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[求助]
小RNA荧光定量茎环法的实验求助!
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请教下做小RNA定量时为什么要采用茎环引物反转录?其目的和优点是什么? 茎环引物与成熟小RNA互补配对区一般7-8个核苷酸,这样能保证反转录的特异性吗? 还有就是如果一个小RNA家族之间只在5‘端有1-2个核苷酸的差异,这样的小RNA在不同组织之间的表达差异会很大吗?这种情况下是根据这个家族设计通用引物还是分别设计引物进行定量分析?我看到有的文献做的荧光定量引物其实是对整个家族进行定量的,现在这样做是否合理,能够被当前杂志认可吗? 还有一个问题是:我做的是植物,请问小rna表达和靶基因的表达对应不上怎么办?是不是植物中的小RNA主要负责RNA的降解而不是翻译抑制? [ Last edited by sunpeng on 2012-7-18 at 15:01 ] |
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