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htshuaizi新虫 (初入文坛)
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TCA/丙酮沉淀法，样品处理
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粉末放入预冷的玻璃匀浆管中，加入 8ml 40mmol/L Tris 溶液，用机械匀浆器冰上匀浆 1 min，冰上静置 5 min 使肝胰脏细胞充分裂解。 将匀浆组织样品转移至 15ml 离心管中，12000 rpm（4oC）离心 30min。 吸取上清转移到另一离心管中，沉淀加 8ml 40mmol/L Tris 溶液，涡旋后于 12000 rpm（4oC）离心 30min，吸取上清与前一次上清合并。 上清液加入 3 倍体积 10%（w/v）TCA、20mM DTT 的丙酮溶液（-20oC 预冷至少 1h），混匀，-20oC 沉淀过夜。 10%TCA,20mMDTT的丙酮溶液：10gTCA.300mgDTT,加入100ml丙酮溶液？ |
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