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我的实时定量溶解曲线图,有问题想请教各位!
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wushuwei1104
银虫
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[交流]
我的实时定量溶解曲线图,有问题想请教各位!
这是我做的实时定量溶解曲线图,图中在目的基因扩增峰前面有个小小的凸起,请问这会影响实验结果吗?这样的图,发英文文章的话可以不可以?还有就是前面的小凸起是什么原因造成的?请各位大侠指点,谢谢!!
第二张扩增曲线中前面有个凹陷,这个是什么造成的?会不会影响实验结果?能不能发英文文章。谢谢!!!
溶解曲线,后面大峰为目的基因峰,前面小凸起。
溶解曲线,后面大峰为目的基因峰,前面小凹陷。
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2012-07-16 11:42:48
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flyaway7585
金虫
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5楼
:
Originally posted by
wmjqy
at 2012-07-16 23:28:01
你这个可能引物设计有问题。碱基对过长,从这个图可以看出你的Tm值都快92了!!!!!引物严重过长,你这个引物用来跑普通PCR的吧~!???.实时荧光定量的引物和普通的引物是有区别的。建议找英韦创津或TAKARA设计或合 ...
上海生工的引物比TAKARA便宜很多,而且质量也相当不错的。
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14楼
2012-07-17 23:00:50
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霹雳光
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wushuwei1104(金币+1): 谢谢参与
不行吧,太简单了吧
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2楼
2012-07-16 11:51:52
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tupac225
金虫
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★ ★
wushuwei1104(金币+1): 谢谢参与
1949stone: 金币+1, 有时候就是不会很完美啊啊
2012-07-17 07:28:31
发英文的肯定不行了,图不是太完美.
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3楼
2012-07-16 12:41:18
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shenye.judy
木虫
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2012-07-16 13:56:09
溶解曲线是不大好看,建议做完qPCR后,可以跑个胶,或者加点染料再跑,看看有没有其他条带的影响。
如果结果还是不好,就建议重新设计引物。
但是,如果你溶解曲线都要提供的话,你应该还要确定你的扩增效率才行啊,这个对qPCR也是很重要的,你可以考虑下。
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4楼
2012-07-16 13:25:08
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