应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒提取
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
141/2返回列表12下一页
查看: 1830  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

bolomeer

铜虫 (小有名气)

[交流] 质粒提取 已有8人参与

我质粒的大小是5368bp，为什么质粒提取后电泳条大这么不在5368bp，而落在更大的条带？为什么两次酶切都出现降解？从电泳图谱看我的实验算不算成功，如果不成功的话，还有哪些需要改进的地方？

质粒条带



酶切条带
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-07-11 21:02:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-07-12 13:55:20
第一张图：点样孔比较亮，可以看出应该是有蛋白质污染，可以测测A260/A280，估计比值在1.8以下，手工提的吧？提的质量不太好，建议换试剂盒提，或者重新提一次.
第二张图：最右边泳道是mark吧，酶切体系是多少，质粒加了多少，量太少了，基本看不出酶切结果，建议加大质粒量酶切，电泳图太模糊了.
赞一下 回复此楼
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-07-12 09:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

applexixixi

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-12 13:55:32
第一张图靠近点样孔的是蛋白，手工提的质粒都难免，我每次提再怎么细心也有蛋白条带。
第二张酶切的图，是单酶切还是双酶切？看位置不像在5kb附近，而且条带太浅。
楼主的图为什么这么不清楚呢？是胶不干净吗，还是有气泡，视觉效果很不好，应该改进一下
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-12 09:34:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windsor2011

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
质粒纯度低，重提。另外调整酶切体系
赞一下 回复此楼
只要功夫深铁杵磨成针
4楼2012-07-12 11:50:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bolomeer

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by windsor2011 at 2012-07-12 11:50:15
质粒纯度低，重提。另外调整酶切体系

谢谢
回复此楼
5楼2012-07-12 19:20:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jlc0225

至尊木虫 (著名写手)
Marker是多大的
回复此楼
开始新的学习！
6楼2012-07-12 19:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sadc

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 呵呵，好全面的分析哇 2012-07-13 16:04:38
太多问题了：
1. 提的质粒，蛋白污染特别严重，上样孔那么亮，这可能都要直接干扰酶切了；
2. 质粒没有酶切前，跑出来的大小肯定和线性的Marker大小不一样的，通常有比较明显的3条带；
3. 酶切的质粒浓度太低了，5k多的质粒，这样淡，一是不好分析，二是往下做连接什么的都会很困难；
4. 把凝胶成像仪擦擦干净，电泳buffer换换，太脏了；
5. 电泳跑的时间太长了，明显已经分开了，还猛跑，全歪了；
还有，不想再找了~
赞一下 回复此楼
7楼2012-07-12 21:43:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tupac225

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
新手吧，祝你好运。楼上的都说了，没啥说的了。
赞一下 回复此楼
coasttocoast。
8楼2012-07-12 22:18:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sd3824289

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这个图可以重新再跑一下，第一幅图，质粒浓度有点低，第二幅图，酶切条带也很弱，建议加大质粒的量或者增加酶切时间！
赞一下 回复此楼
坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
9楼2012-07-14 09:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bolomeer

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by sd3824289 at 2012-07-14 09:58:27
你这个图可以重新再跑一下，第一幅图，质粒浓度有点低，第二幅图，酶切条带也很弱，建议加大质粒的量或者增加酶切时间！

酶切时间增加是不是给容易降解
赞一下 回复此楼
10楼2012-07-14 21:02:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bolomeer 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 322求调剂 +5 旧吢 2026-03-24 5/250 2026-03-28 13:26 by Iveryant
[考研] 0703一志愿9，初试成绩：338，四六级已过，有科研经历，求调剂！ +4 Zuhui0306 2026-03-25 4/200 2026-03-28 13:07 by 唐沐儿
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分 +5 dongfang59 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:53 by wxiongid
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +10 幸运的酱酱 2026-03-22 12/600 2026-03-27 16:08 by muchong357
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 312求调剂 +9 上岸吧ZJY 2026-03-22 13/650 2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭