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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒提取
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bolomeer

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by sadc at 2012-07-12 21:43:37
太多问题了：
1. 提的质粒，蛋白污染特别严重，上样孔那么亮，这可能都要直接干扰酶切了；
2. 质粒没有酶切前，跑出来的大小肯定和线性的Marker大小不一样的，通常有比较明显的3条带；
3. 酶切的质粒浓度太低了， ...

你们做质粒提取和质粒酶切的电泳条件是多少，我用的是0.7%的凝胶，130V，15min。
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11楼2012-07-14 21:04:29
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bolomeer

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jlc0225 at 2012-07-12 19:45:32
Marker是多大的

λ-EcoT14 I digest DNA Marker
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12楼2012-07-14 21:09:52
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sadc

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by bolomeer at 2012-07-14 21:04:29
你们做质粒提取和质粒酶切的电泳条件是多少，我用的是0.7%的凝胶，130V，15min。...

这个没什么问题吧，一般如果切的有小片段用1%的吧。
太低的胶容易糊成一团。
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13楼2012-07-14 21:57:36
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moqiyilei

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胶图不漂亮，Mark没说清，问题就都是浮云，下次弄张漂亮的图再问问题。
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14楼2012-07-15 13:19:38
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