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0108winfield

金虫 (正式写手)

[求助] 求MIC值测法

我想测定一种抗生素对某种菌的mic值,不知道有什么精确一点的办法没有?
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信念,就是即使看不到长阶通向何方,却仍愿意迈出第一步。
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zjwsw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-07-12 18:10:17
若你选的抗生素是亲水的,可用对倍肉汤稀释法测定对某种菌的mic值;若非水溶性,可采用琼脂稀释法测定对某种菌的mic值。
2楼2012-07-12 11:01:14
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做一个幸福人

银虫 (正式写手)

★
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块交流 2012-09-08 17:02:44
方法应该有纸片扩散法和琼脂稀释法,常量肉汤稀释法,微量肉汤稀释法。纸片扩散法是半定量。微量肉汤稀释法将药物用肉汤倍比稀释,按浓度顺序50ul加入96孔板中,再加入0.5麦氏单位的菌悬液。肉眼观察无细菌生长澄清透亮的最低药物浓度孔值为MIC 值。
3楼2012-07-15 15:33:35
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
zhang8826857: 金币+2, 欢迎来微生物板块交流 2012-09-08 17:02:51
要想得到精确一点的结果,建议分两步,第一步可以用平板滤纸片抑菌法,先把抗生素大体对菌体抑菌有效果的抑制浓度区间找出来,这一步中,建议抗生素浓度梯度拉的大写一些,可以5倍稀释或者10倍稀释,知道能够抑制菌体生长的极限浓度后,第二步在这个浓度与上个浓度之间再设2倍稀释或者更小的梯度,用96孔板液体培养菌体后,加入抗生素培养后测吸光度比较变化就可以得到更为精确的MIC~
聪明才智要为意外做准备~~
4楼2012-07-15 18:26:05
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0108winfield

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 做一个幸福人 at 2012-07-15 15:33:35
方法应该有纸片扩散法和琼脂稀释法,常量肉汤稀释法,微量肉汤稀释法。纸片扩散法是半定量。微量肉汤稀释法将药物用肉汤倍比稀释,按浓度顺序50ul加入96孔板中,再加入0.5麦氏单位的菌悬液。肉眼观察无细菌生长澄清 ...

你说的用96孔板测mic值的菌悬液的浓度有没有界定,还有就是必须用肉汤稀释吗,如果我用配抗生素的容积稀释效果会一样吗?
信念,就是即使看不到长阶通向何方,却仍愿意迈出第一步。
5楼2012-09-08 11:30:02
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做一个幸福人

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 0108winfield at 2012-09-08 11:30:02
你说的用96孔板测mic值的菌悬液的浓度有没有界定,还有就是必须用肉汤稀释吗,如果我用配抗生素的容积稀释效果会一样吗?...

抗生素母液浓度一般不低于1000ug/L或者10倍于最高测试浓度;稀释的溶剂标准操作推荐使用离子校正的M-H肉汤(CAM-HB).
6楼2012-09-08 20:44:52
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sonumlhamo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 做一个幸福人 at 2012-09-08 20:44:52
抗生素母液浓度一般不低于1000ug/L或者10倍于最高测试浓度;稀释的溶剂标准操作推荐使用离子校正的M-H肉汤(CAM-HB)....

“稀释的溶剂标准操作推荐使用离子校正的M-H肉汤(CAM-HB)”是什么意思,可不可以说的更详细一点~mic值可不可以做个标准曲线来确定它的精确mic?
7楼2013-04-04 09:20:10
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