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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

[求助] PCR水污染 已有1人参与

我用PCR做阳性苗筛选。加入以下试剂：
1.新开封的水
2.taq
3.taq buffer
4.dNTP
5.两条primer
跑出来的条带：
1.水有非常亮的条带
2.筛选的植株中有的没有条带

图片的marker是1kb plus。1号泳道是水对照，后面的均为植株DNA的PCR条带



请各位大神帮忙解答这是什么情况？



[ Last edited by 我是小纯洁 on 2012-7-9 at 19:21 ]
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1楼 2012-07-09 19:18:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我是小纯洁: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-07-10 22:33:43
最好把试剂都换掉重新做一次，明显是试剂污染的问题，水的话你不放心可以用娃哈哈纯净水，这个绝对靠谱，我们实验室用了很多次.
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-07-10 09:27:31
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普通回帖

shenye.judy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-10 13:50:07
就是说阴性对照产物明显（确定条带位置正确的话），那就是你的试剂估计有污染了，是不是你们实验室一直在做这个基因，或者有别人一起在做。如果是污染的话，建议用一套新的，枪也换，可以去其他实验室做。
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2楼2012-07-09 19:43:10
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-10 13:50:16
可能是你操作过程中的失误吧，恰巧了。只要片段大小是正确的话，我感觉楼主不需要太紧张。很可能是你操作过程中失误将水污染了
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3楼2012-07-09 22:22:17
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蓝慧

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Marado at 2012-07-10 10:27:31
最好把试剂都换掉重新做一次，明显是试剂污染的问题，水的话你不放心可以用娃哈哈纯净水，这个绝对靠谱，我们实验室用了很多次.

娃哈哈纯净水？真的这么有用吗？
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向着目标前进！
5楼2012-07-10 10:09:45
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cxwu10016869

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
将所有试剂换新的，重新做。注意Tip头及移液器别污染。
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6楼2012-07-10 11:29:19
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 蓝慧 at 2012-07-10 10:09:45
娃哈哈纯净水？真的这么有用吗？...

绝对有效，16s都P不出条带，娃哈哈我们实验室都用这个，不是打广告呦
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7楼2012-07-10 11:35:06
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nemo88

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-10 13:50:30
本帖内容被屏蔽
8楼2012-07-10 12:08:23
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-07-09 22:22:17
可能是你操作过程中的失误吧，恰巧了。只要片段大小是正确的话，我感觉楼主不需要太紧张。很可能是你操作过程中失误将水污染了

貌似是气溶胶啊。。。
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9楼2012-07-10 22:33:24
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by nemo88 at 2012-07-10 12:08:23
是不是长期使用这对引物PCR相关基因
是的话就是气溶胶。。。
没条件的话换个环境做。。。或者用有滤膜的枪头，在超净台里试试

是啊。。其实这个基因是卡纳。每天做的菌里面都有啊。。
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10楼2012-07-10 22:48:37
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