应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教壳聚糖/戊二醛固定化酶 的问题,谢谢！
51/1返回列表
查看: 3657  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

一道

木虫 (正式写手)

[求助] 请教壳聚糖/戊二醛固定化酶 的问题,谢谢！ 已有2人参与

各位老师同学，大家好：
      我最近在做壳聚糖/戊二醛固定化酶的实验，将壳聚糖和戊二醛在pH7.5的缓冲液中反应后，壳聚糖颜色变得稍微有些黄色，将其多次冲洗后在pH7.5的缓冲液中与酶温育固定化，但温育后的产物酶活检测却没有酶活。请问在这方面经验的各位前辈，我的实验操作过程中存在什么问题，该怎么改进，谢谢！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-08 11:42:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一道

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bamage at 2012-07-08 13:18:48
壳聚糖不是用醋酸来溶解的吗，pH7.5 壳聚糖没溶解所以才显示黄色。而且戊二醛交联时在酶与壳聚糖固定化后的步骤吧，戊二醛交联后再与酶反应，会不会酶就很难吸附上去所以检测不到酶活。

非常感谢您的回复。我看文献中如您所说的用醋酸溶解的是用于制备壳聚糖小球时才用的。文献中介绍的都是先是壳聚糖和戊二醛先反应，然后再再与酶固定的，其原理是先用壳聚糖上的氨基与戊二醛中的一个醛基反应，然后用另一醛基与酶蛋白上的氨基反应。请问你做的时候使用的是“戊二醛交联发生在在酶与壳聚糖固定化后的步骤”吗，谢谢
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-08 17:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

bamage

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
一道: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢您的回复，希望咱们多多交流哈 2012-07-08 17:13:27
壳聚糖不是用醋酸来溶解的吗，pH7.5 壳聚糖没溶解所以才显示黄色。而且戊二醛交联时在酶与壳聚糖固定化后的步骤吧，戊二醛交联后再与酶反应，会不会酶就很难吸附上去所以检测不到酶活。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-07-08 13:18:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一道

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bamage at 2012-07-08 13:18:48
壳聚糖不是用醋酸来溶解的吗，pH7.5 壳聚糖没溶解所以才显示黄色。而且戊二醛交联时在酶与壳聚糖固定化后的步骤吧，戊二醛交联后再与酶反应，会不会酶就很难吸附上去所以检测不到酶活。

非常感谢您的回复。我看文献中如您所说的用醋酸溶解的是用于制备壳聚糖小球时才用的。文献中介绍的都是先是壳聚糖和戊二醛先反应，然后再再与酶固定的，其原理是先用壳聚糖上的氨基与戊二醛中的一个醛基反应，然后用另一醛基与酶蛋白上的氨基反应。请问你做的时候使用的是“戊二醛交联发生在在酶与壳聚糖固定化后的步骤”吗，谢谢
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-08 17:12:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

IMB2009

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 回帖置顶 2012-07-08 20:06:28
一道: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-07-09 09:40:55
戊二醛的共价交联反应条件相对剧烈（与吸附，包埋等相比），你的酶如果不坚挺，交联后没有活性很正常。多冲洗几次，避免吸附的影响，你可以测下你的交联率。
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-08 18:34:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭