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hbzlj0518

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC-ELSD分析成分时,如何判断峰纯度?

最近在用蒸发光,虽然是通用型检测器,对于无紫外吸收的化合物来说,比较适用。但最近出现了一些问题:
1.在蒸发光为检测器的液相中,如何判断一个峰是否为单一成分所产生?(即在分离的过程中,会有些峰会跟另外的峰重合,如何辨别?)
2.在液相条件的筛选中,条件稍微变化一下,峰面积就增加50%,这个合理吗?

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hbzlj0518

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by herb_fcwr at 2012-07-06 13:27:54
对于如何判断是否为单一物质,如果嫌麻烦可以试着延长出峰时间,还是一个峰的话,只能说90%是没有重叠的。如果想确定的话,仅靠HPLC检测是不准确的,可以试试TLC、MS、NMR等检测方法,还可以试试熔点测定,以上条件 ...

谢啦,不过,我用蒸发光来测定含量,其一,通过TLC,MS,NMR来判定峰纯度,这样不是增加了这个实验的工作量,况且,即使用TCL在特定指示剂的显色作用下显色,也不能在蒸发光总试用啊,毕竟薄层不能以蒸发光为监测器吧?其实我想判定峰纯度,是因为在我需要的测定的成分旁边有很多小峰,我改变了条件,分离出了几个,但是,我不能保证我把所有的小峰都与我需要的物质分开了。
其二,我疑惑峰面积的原因是因为,我改变了流动相条件,但是峰面积呈现不规则的变化,比如说,峰A增加50%,而峰B确几乎没有增加。我下的结论是,可能我用的是梯度洗脱,所以,所有的峰面积不呈现相同的变化趋势。对于这个,我只能用外标法定量,然后再确定是否正常了。
3楼2012-07-07 11:24:47
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