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chenwu9987

银虫 (小有名气)


[交流] DNA怎样形成发夹结构

最近买了一条DNA链,5’-TexasRed-Sample TextCGATGCGGAAAGAAGGSample Text-3’
想问一下,DNA链本身在水溶液中会自发形成发夹结构吗?会不会形成二聚体呢
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bbwalkman

木虫 (小有名气)


★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-07 13:38:33
引用回帖:
11楼: Originally posted by chenwu9987 at 2012-07-06 11:01:53
我想要这条链自身在溶液中形成发夹结构,之后再加入一条和这条链中间黑色碱基配对的DNA,杂交,是发夹结构解开,释放出碱基5’端的TTTTTT。  因为DNA杂交一般都是先升温在降温,所以我以为同样的方法处理上述DNA链 ...

那这就和分子信标的原理一样了,你可以看看关于分子信标的相关文献,谭蔚泓做的好像还是比较地道的,那你如果怕链和链之间有杂交的话,那就先高温加热几分钟,一般是95℃就可以了,然后缓慢降到室温待一阵,再加入你的Target,这样做还是比较好的,如果条件允许的话(可以适当加一部分你的酶反应Buffer,如果没有就算了),有一定的盐离子浓度还是有助于闭环的。
15楼2012-07-06 17:38:47
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chenwu9987

银虫 (小有名气)


写错了,DNA链中红色字体应分别为TTTTTT           AAAAAA
2楼2012-07-05 15:30:37
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chenwu9987

银虫 (小有名气)


不退火是不是就无法形成啊
4楼2012-07-05 15:57:53
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gelois

金虫 (正式写手)


★ ★
chenwu9987(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-06 13:49:51
一般储存情况下是不会形成发卡结构的,只有在PCR过程中,退火的时候,如果自身有发卡结构的话会比较容易形成。所以在PCR的时候要注意退火温度。
5楼2012-07-05 16:09:36
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