| 查看: 3245 | 回复: 0 | ||||
a070274011新虫 (初入文坛)
|
[交流]
醋酸纤维素薄膜电泳方法
|
|
醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量少，5μg的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。 醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。 ⒈材料与试剂 醋酸纤维素膜一般使用市售商品，常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液，浓度在0.05-0.09mol/L。 ⒉操作要点 ⑴膜的预处理：必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液，浸透后，取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液，不可吸得过干。 ⑵加样：样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。对血清蛋白质的常规电泳分析，每cm加样线不超过1μl，相当于60-80μg的蛋白质。 ⑶电泳：可在室温下进行。电压为25V/cm，电流为0.4-0.6mA/cm宽。 ⑷染色：一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红，糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂，脂蛋白则用苏丹黑或品红亚硫酸染色。 ⑸脱色与透明：对水溶性染料最普遍应用的脱色剂是5％醋酸水溶液。为了长期保存或进行光吸收扫描测定，可浸入冰醋酸：无水乙醇＝30:70（V/V）的透明液中。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 醋酸纤维素 |
» 猜你喜欢
271材料工程求调剂
已经有6人回复
-
材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂
已经有8人回复
-
288求调剂
已经有9人回复
-
一志愿武汉理工材料工程专硕调剂
已经有4人回复
-
085601材料工程专硕求调剂
已经有10人回复
-
321求调剂
已经有8人回复
-
一志愿北京化工大学0703化学318分，有科研经历，求调剂
已经有3人回复
-
307求调剂
已经有6人回复
-
266求调剂
已经有10人回复
-
本人考085602 化学工程 专硕
已经有19人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
薄膜太阳能电池企业Konarka申请破产 （转载）
已经有11人回复
- RNA电泳图 好奇怪 什么原因呀
已经有18人回复
- DNA 电泳图谱分析 新手请教
已经有9人回复
- 小分子蛋白电泳marker
已经有15人回复
- Ebook__《双向电泳原理与方法》第三版
已经有281人回复
- 双向电泳，蛋白定量测定用方法的讨论
已经有14人回复
- 【求助】多糖电泳方法的选择
已经有5人回复
- 【讨论】毛细管电泳基线乱的处理方法
已经有7人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
