应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » G418 和puromycin共筛选
81/1返回列表
查看: 3543  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] G418 和puromycin共筛选

本人准备同时转染带有neo和puro筛选标记的质粒到细胞中，所以要共筛选，有木有大侠可提供参考资料？同时问一下是293比较好还是CHO比较好？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-06-25 10:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 鼓励发帖！ 2012-06-26 08:15:16
细胞对G418+PURO的周期一样么
我记得似乎是G418两周，PURO一周左右。。。
没这样转过，观望中。。。
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-25 20:51:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

countingcrow

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 鼓励发帖！ 2012-06-26 08:15:27
首先提醒，293不能用来作G418稳转，因为293本身就是G418稳转出来的，带一个腺病毒E1基因。

本人没有做过两种抗生素的稳转，但是我建议，先压成一种，再压另一种，否则细胞估计会死光光。

至于具体步骤，网上或者文献里查吧。
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-26 06:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keennes

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainontime: 金币+10 2012-09-03 14:44:38
先摸抗生素作用浓度，我两种共转U2OS细胞，puro 2μg/ml;G418,500-1000μg/ml，压细胞克隆成功了。
赞一下 回复此楼
独上高楼，望尽天涯路……
4楼2012-06-27 00:26:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keennes

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mamadexiao at 2012-06-25 20:51:00
细胞对G418+PURO的周期一样么
我记得似乎是G418两周，PURO一周左右。。。
没这样转过，观望中。。。

不同的细胞不一样。puro比G418起效快些，有的细胞三四天就可以了。
赞一下 回复此楼
独上高楼，望尽天涯路……
5楼2012-06-27 00:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by countingcrow at 2012-06-26 06:31:29
首先提醒，293不能用来作G418稳转，因为293本身就是G418稳转出来的，带一个腺病毒E1基因。

本人没有做过两种抗生素的稳转，但是我建议，先压成一种，再压另一种，否则细胞估计会死光光。

至于具体步骤，网上或 ...

大侠你说的是293T吧。。。。。还是293啊？？求验证。
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-27 09:09:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by keennes at 2012-06-27 00:26:16
先摸抗生素作用浓度，我两种共转U2OS细胞，puro 2μg/ml;G418,500-1000μg/ml，压细胞克隆成功了。

那后面稳定加压是不是用这些浓度的一半？
赞一下 回复此楼
7楼2012-06-27 09:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keennes

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by rainontime at 2012-06-27 09:12:04
那后面稳定加压是不是用这些浓度的一半？...

我是G418维持在500，puro还是2
赞一下 回复此楼
独上高楼，望尽天涯路……
8楼2012-06-27 12:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rainontime 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +8 majunge000 2026-08-10 9/450 2026-08-12 22:17 by 虫友是什么虫
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭