24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3264  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] G418 和puromycin共筛选

本人准备同时转染带有neo和puro筛选标记的质粒到细胞中,所以要共筛选,有木有大侠可提供参考资料?同时问一下是293比较好还是CHO比较好?谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

countingcrow

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 鼓励发帖! 2012-06-26 08:15:27
首先提醒,293不能用来作G418稳转,因为293本身就是G418稳转出来的,带一个腺病毒E1基因。

本人没有做过两种抗生素的稳转,但是我建议,先压成一种,再压另一种,否则细胞估计会死光光。

至于具体步骤,网上或者文献里查吧。
3楼2012-06-26 06:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 鼓励发帖! 2012-06-26 08:15:16
细胞对G418+PURO的周期一样么
我记得似乎是G418两周,PURO一周左右。。。
没这样转过,观望中。。。
2楼2012-06-25 20:51:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keennes

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rainontime: 金币+10 2012-09-03 14:44:38
先摸抗生素作用浓度,我两种共转U2OS细胞,puro 2μg/ml;G418,500-1000μg/ml,压细胞克隆成功了。
独上高楼,望尽天涯路……
4楼2012-06-27 00:26:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keennes

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mamadexiao at 2012-06-25 20:51:00
细胞对G418+PURO的周期一样么
我记得似乎是G418两周,PURO一周左右。。。
没这样转过,观望中。。。

不同的细胞不一样。puro比G418起效快些,有的细胞三四天就可以了。
独上高楼,望尽天涯路……
5楼2012-06-27 00:29:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业,初试351分,复试被刷求调剂! +7 真名有冰 2026-03-29 8/400 2026-03-30 21:08 by maaj02
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +7 JKSOIID 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:10 by 滴滴上岸呀
[考研] 083000环境科学与工程调剂,总分281 +3 橙子(胜意) 2026-03-30 3/150 2026-03-30 20:07 by piklet
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +5 min3 2026-03-24 6/300 2026-03-30 18:42 by 544594351
[考研] 287求调剂 +14 land xuxu 2026-03-26 14/700 2026-03-30 18:38 by 544594351
[考研] 310求调剂 +10 争取九点睡 2026-03-30 10/500 2026-03-30 16:45 by ztnimte
[考研] 318求调剂 +7 陈晨79 2026-03-30 7/350 2026-03-30 10:49 by 探123
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-29 20:21 by dophin1985
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 085600,专业课化工原理,321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
信息提示
请填处理意见