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1115291299

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 做组织培养诱导不出愈伤组织

正在做羌活(伞形科,羌活属植物)的组织培养,以叶片为外植体,MS+6-BA+NAA的培养基。培养一个月了,在几个不同比例6-BA与NAA的培养基上均未形成愈伤组织,只是叶片的面积扩大了。请教高人指点,怎么改进植物激素浓度。
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coal@live.cn

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
1115291299: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-30 21:29:09
1115291299: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-30 21:32:15
我有几点建议:
1、lz请先去参考同种植物(同种没有就同属,同属没有就同科)的组培文献中的基本培养基配方,不同植物所需培养基能相差很大,比如兰花是用MS,但木本植物通常都用DCR和WPM;
2、愈伤是从伤口中长的,你确定你的叶片是剪成小块叶盘后再放进去培养的吗?
3、不同外植体由于生理条件不同,培养时的反应能相差很大,叶片不行的话就试试茎尖、茎段、根、花茎、子房、合子胚等组织;
4、诱导愈伤一般用2-4D和BA配合,NAA和BA组合通常是用来茎芽增殖的。激素的梯度设置很重要,这点最好也先参考同类文献找个基准值,然后再向上向下设不同梯度;
5、组培很耗时间,愈伤有可能一周就长,也有可能一个月才长,所以lz要有耐心,在一次实验中就多设置些处理和重复。
8楼2012-06-25 14:28:28
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潘燕

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
形成愈伤组织要经历三个时期,起动期,分裂期和形成期。叶片面积扩大了,又未形成愈伤组织,是不是你搞错了?不是在分裂期吗?而且培养时间也长了,你的培养基确保正确吗?还有你操作时的环境呀,操作细节和方法上,都没问题吗?如果这些你都确保无误的话,那就试着换一种激素看看诱导效果,常用的激素有2,4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸、吲哚乙酸、细胞分裂素等。
赠人玫瑰,手有余香。互帮互助,共同进步。
2楼2012-06-22 01:05:17
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有做不加激素的对照吗?
Tobeornottobe,that'saproblem
3楼2012-06-22 09:25:35
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1115291299

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by niushuaiji at 2012-06-22 09:25:35
没有做不加激素的对照吗?

没有
4楼2012-06-22 09:34:16
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