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1115291299铁杆木虫 (正式写手)
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[求助]
做组织培养诱导不出愈伤组织
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| 正在做羌活（伞形科，羌活属植物）的组织培养，以叶片为外植体，MS+6-BA+NAA的培养基。培养一个月了，在几个不同比例6-BA与NAA的培养基上均未形成愈伤组织，只是叶片的面积扩大了。请教高人指点，怎么改进植物激素浓度。 |
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【答案】应助回帖
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1115291299: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-30 21:29:09
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我有几点建议： 1、lz请先去参考同种植物（同种没有就同属，同属没有就同科）的组培文献中的基本培养基配方，不同植物所需培养基能相差很大，比如兰花是用MS，但木本植物通常都用DCR和WPM； 2、愈伤是从伤口中长的，你确定你的叶片是剪成小块叶盘后再放进去培养的吗？ 3、不同外植体由于生理条件不同，培养时的反应能相差很大，叶片不行的话就试试茎尖、茎段、根、花茎、子房、合子胚等组织； 4、诱导愈伤一般用2－4D和BA配合，NAA和BA组合通常是用来茎芽增殖的。激素的梯度设置很重要，这点最好也先参考同类文献找个基准值，然后再向上向下设不同梯度； 5、组培很耗时间，愈伤有可能一周就长，也有可能一个月才长，所以lz要有耐心，在一次实验中就多设置些处理和重复。 |
8楼2012-06-25 14:28:28
2楼2012-06-22 01:05:17
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非常感谢您的解答。您郁闷，我也郁闷啊！情况是这样的：我做的羌活这种植物的组培前人研究不多，所以暂时用的MS培养基，25℃，pH5.8培养，都是一般植物通用的营养与培养条件。至于无菌环境，您觉得我会二到不知道培养的东西被污染了吗?关于操作，之前做的草莓的，现在也生根长成小植株了，羌活这个现在观察叶片也在长得可以，没有发现褐化或者消毒液残留造成的毒害，叶片在长大，只是没有愈伤组织发生，其他会有什么影响暂时没想到，可能也不知道，还请您指教。我主要是想各位高人在植物激素这块支支招。最后，针对您的鄙视，鉴于我还是一名本科生，也没系统得学习植物学，况且眼高手低我也认，希望您理解一下。 |
7楼2012-06-22 15:19:50
niushuaiji
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