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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 抗菌肽抑菌求助
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)

[交流] 抗菌肽抑菌求助

本人现在是在做抗菌肽的发酵以及提取的工作，首先做固态发酵培养，用的是普通的细菌固态培养基，37℃，培养16h，生物量有300多亿，但是产物无抑菌活性，然后我调整培养基配方加大氮源减少碳源，来调节碳源氮源比例，同样培养条件但还是无抑菌活性。另一方面，做液体发酵培养，LB培养基，培养18h，做抑菌活性试验在3小时后就基本没有抑菌活性或者抑菌圈不明显，也是生物量基本无变化，个人认为抗菌肽在液体环境下活性成分不稳定，所以这也是首先考虑固态发酵的原因，希望各位虫友能够多给点意见，不论什么一件都可以，谢谢，非常感谢！

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1楼 2012-06-21 17:18:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zenghong

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你把发酵时间延长48h看看
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2楼2012-06-22 08:38:23
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普通回帖

casey200788

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你用的是构建的工程菌还是菌的次级代谢产物是抗菌肽？
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3楼2012-06-22 09:59:10
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zenghong at 2012-06-22 08:38:23
你把发酵时间延长48h看看

好的，谢谢，正在试验中
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4楼2012-06-22 10:07:06
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by casey200788 at 2012-06-22 09:59:10
你用的是构建的工程菌还是菌的次级代谢产物是抗菌肽？

次级代谢产物，不是工程菌，若是工程菌就会回到分子阶段去找原因
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5楼2012-06-22 10:08:39
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wgy2007

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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pengyou朋友: 金币+3, 谢谢建议，继续试验中 2012-06-28 14:38:17
抗菌肽应该有个合适的pH的范围才有活性，如果超出范围可能会使抗菌肽丧失活性或不产抗菌肽。
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6楼2012-06-22 15:41:15
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wgy2007 at 2012-06-22 15:41:15
抗菌肽应该有个合适的pH的范围才有活性，如果超出范围可能会使抗菌肽丧失活性或不产抗菌肽。

通常应该是6到7吧？你认为是多少？
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7楼2012-06-25 11:07:54
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zenghong at 2012-06-22 08:38:23
你把发酵时间延长48h看看

我延长到36小时没有效果或效果不明显，ph，氮原类别及量，合适的培养时间对每朱菌是不是不一样？还有有点奇怪，我用mrs发酵培养，竟然发酵后ph达到8.0——8.5？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2012-06-27 15:13:12
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zenghong at 2012-06-22 08:38:23
你把发酵时间延长48h看看

我延长到36小时没有效果或效果不明显，ph，氮原类别及量，合适的培养时间对每朱菌是不是不一样？还有有点奇怪，我用mrs发酵培养，竟然发酵后ph达到8.0——8.5？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2012-06-27 15:13:55
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by pengyou朋友 at 2012-06-22 10:07:06
好的，谢谢，正在试验中...

延长48h不行，效果几乎没有，发现在发酵24小时时，ph就上升到8.0了，会不会是ph影响？
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10楼2012-06-28 10:30:15
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ahxalg3211

金虫 (初入文坛)
★
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是怎么提取的呢？有考虑浓缩吗？
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11楼2012-06-28 10:50:27
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pengyou朋友

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by ahxalg3211 at 2012-06-28 10:50:27
是怎么提取的呢？有考虑浓缩吗？

上清液离心粗体，但是粗提取后抑菌圈变小了，有的甚至没有，郁闷！
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12楼2012-06-28 14:28:12
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ZHK799467632

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
微生物发酵产抗菌肽，这个应该是保外产物，第一有没有表达，表达量多少，第二 抗菌肽提取过程中有没有被酶解，第三 抗菌肽所处环境，对其影响。个人是这么分析的。
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13楼2012-07-19 16:23:48
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wt3532

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
既然是次级代谢产物，你有没有什么证明能够证明细菌产抗菌肽而不是其它的产物。之前的发酵产物做没做个抑菌试验，如果做过，之前的培养条件是什么。
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14楼2012-07-21 08:36:42
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zjl01234

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
既然测不到活性，那你怎么知道这菌有抗菌肽的？别人怎么测出活性的？

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15楼2012-07-21 21:28:21
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chenyyy

无虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
首先你得先确定，你的发酵产物中有这个抑菌肽。。。。。
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16楼2012-07-22 12:38:22
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kcb331202273

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问，你做的什么菌啊。
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17楼2012-07-24 13:36:01
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hua199

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的抗菌肽对哪些菌有作用，会不会对宿主菌有作用。
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18楼2015-08-11 14:02:00
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一刀do

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
调整培养基组成，还有一些必须的微量元素，控制pH，还有诱导条件实验。关于提取，粗离心是不够的，你得先破碎细胞。
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19楼2015-08-11 16:53:30
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