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zhouwenzhe

银虫 (小有名气)

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4楼: Originally posted by 月月大可 at 2012-06-20 21:42:54
呵呵,有点意思啊。我还不清楚这种仪器电离化的方法,但是你说了分子量是20kd,现在结果是20445,说明就是单电荷的。    我的理解标准品是用来给你分析误差的,表明是已知分子量,现在测试,你就能算出误差率。 然后 ...

您好,麻烦问一下,我的物质理论分子量是3800左右,然后质谱测试值比我的体积要多60多,这个是误差原因,还是是我的物质里面还有其他含量呢?谢谢
11楼2012-06-28 15:02:12
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月月大可

木虫 (著名写手)

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11楼: Originally posted by zhouwenzhe at 2012-06-28 15:02:12
您好,麻烦问一下,我的物质理论分子量是3800左右,然后质谱测试值比我的体积要多60多,这个是误差原因,还是是我的物质里面还有其他含量呢?谢谢...

我着实不是搞质谱的,不过是准备过一次文献课,上过两次培训而已,连略知皮毛都谈不上。 对于您的问题,不清楚原因,抱歉
12楼2012-06-28 15:50:36
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cpn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lz,这两张MALDI的图其实不太好,你有没注意到,你的第一张谱图处的9千多还出了一个峰,感觉像是做MALDI时激光能量太大,双电荷峰都出来了。
另外,这两张谱图应该是分别累加多张谱图累加出来的吧?一个像大包的峰里有个尖峰突出来,比较奇怪,如果是多张谱图累加出来的,也就不奇怪了,MALDI存在结晶不均匀的问题,在不同的点打出来的图可能会略有差别。
其实你更应该关注,你的峰宽都有1500Da了,分子量标出来差个几百Da,也不是不可能的事。
你可以把两张图stack比对看看。
13楼2012-08-09 12:48:23
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nannan2628

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-06-20 17:03:45
你先对照你的蛋白分子量看看啊,我看不像是酶切之后的,倒像是直接给你样品分析的,不知道你的样品纯度如何?

您好,请问做质谱需要的样品纯度一般是什么样的情况呢?
14楼2013-05-17 15:32:16
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by nannan2628 at 2013-05-17 15:32:16
您好,请问做质谱需要的样品纯度一般是什么样的情况呢?...

要看你用什么质谱了哦,理论上是不考虑样品纯度的,还有浓度不要太低啊。
15楼2013-05-17 17:02:06
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nannan2628

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by dshlove at 2013-05-17 17:02:06
要看你用什么质谱了哦,理论上是不考虑样品纯度的,还有浓度不要太低啊。...

非常感谢您的回复O(∩_∩)O~
不用考虑杂质蛋白对目标蛋白的干扰吗?浓度应该不成问题,样品是用干粉自己配制的,浓度应该好控制的,您说的不要太低有没有具体的量的经验值呢?
16楼2013-05-19 00:29:17
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢回答问题 2013-05-19 08:57:14
引用回帖:
16楼: Originally posted by nannan2628 at 2013-05-19 00:29:17
非常感谢您的回复O(∩_∩)O~
不用考虑杂质蛋白对目标蛋白的干扰吗?浓度应该不成问题,样品是用干粉自己配制的,浓度应该好控制的,您说的不要太低有没有具体的量的经验值呢?...

因为质谱本身就是要有检测多种物质的能力的,所以不能担心杂蛋白的影响、
我现在用的是单TOF,一般要求不低于0.5 mg/ml.
17楼2013-05-19 01:09:56
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niuyee

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个质谱检测应该是普通的质谱,通常普通的质谱检测误差范围为1%,高精度质谱检测分子量可以精确到1Da,先根据你的蛋白分子量序列算一下你的理论分子量后,看看是否在误差范围之内吧!质谱检测要求样品的纯度应能达到90%以上!再就是对图谱不懂的可以跟检测单位的检测人沟通一下,检测的方法及使用的标准品一般都是可以提供的。希望能帮到你!
18楼2013-06-08 10:31:11
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niuyee

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by nannan2628 at 2013-05-17 15:32:16
您好,请问做质谱需要的样品纯度一般是什么样的情况呢?...

一般要求样品的纯度大于90%
19楼2013-06-08 10:32:56
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yuanxiaoxin

新虫 (初入文坛)

问下楼主对蛋白样品是怎么处理的呢?酶切了么还是直接用基质打质谱
20楼2016-03-19 13:18:35
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