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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于质谱测定蛋白质分子量的图谱分析
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zhouwenzhe

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 月月大可 at 2012-06-20 21:42:54
呵呵，有点意思啊。我还不清楚这种仪器电离化的方法，但是你说了分子量是20kd，现在结果是20445，说明就是单电荷的。    我的理解标准品是用来给你分析误差的，表明是已知分子量，现在测试，你就能算出误差率。 然后 ...

您好，麻烦问一下，我的物质理论分子量是3800左右，然后质谱测试值比我的体积要多60多，这个是误差原因，还是是我的物质里面还有其他含量呢？谢谢
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11楼2012-06-28 15:02:12
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月月大可

木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by zhouwenzhe at 2012-06-28 15:02:12
您好，麻烦问一下，我的物质理论分子量是3800左右，然后质谱测试值比我的体积要多60多，这个是误差原因，还是是我的物质里面还有其他含量呢？谢谢...

我着实不是搞质谱的，不过是准备过一次文献课，上过两次培训而已，连略知皮毛都谈不上。 对于您的问题，不清楚原因，抱歉
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12楼2012-06-28 15:50:36
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cpn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lz，这两张MALDI的图其实不太好，你有没注意到，你的第一张谱图处的9千多还出了一个峰，感觉像是做MALDI时激光能量太大，双电荷峰都出来了。
另外，这两张谱图应该是分别累加多张谱图累加出来的吧？一个像大包的峰里有个尖峰突出来，比较奇怪，如果是多张谱图累加出来的，也就不奇怪了，MALDI存在结晶不均匀的问题，在不同的点打出来的图可能会略有差别。
其实你更应该关注，你的峰宽都有1500Da了，分子量标出来差个几百Da，也不是不可能的事。
你可以把两张图stack比对看看。
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13楼2012-08-09 12:48:23
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nannan2628

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-06-20 17:03:45
你先对照你的蛋白分子量看看啊，我看不像是酶切之后的，倒像是直接给你样品分析的，不知道你的样品纯度如何？

您好，请问做质谱需要的样品纯度一般是什么样的情况呢？
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14楼2013-05-17 15:32:16
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by nannan2628 at 2013-05-17 15:32:16
您好，请问做质谱需要的样品纯度一般是什么样的情况呢？...

要看你用什么质谱了哦，理论上是不考虑样品纯度的，还有浓度不要太低啊。
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15楼2013-05-17 17:02:06
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nannan2628

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by dshlove at 2013-05-17 17:02:06
要看你用什么质谱了哦，理论上是不考虑样品纯度的，还有浓度不要太低啊。...

非常感谢您的回复O(∩_∩)O~
不用考虑杂质蛋白对目标蛋白的干扰吗？浓度应该不成问题，样品是用干粉自己配制的，浓度应该好控制的，您说的不要太低有没有具体的量的经验值呢？
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16楼2013-05-19 00:29:17
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢回答问题 2013-05-19 08:57:14
引用回帖:
16楼: Originally posted by nannan2628 at 2013-05-19 00:29:17
非常感谢您的回复O(∩_∩)O~
不用考虑杂质蛋白对目标蛋白的干扰吗？浓度应该不成问题，样品是用干粉自己配制的，浓度应该好控制的，您说的不要太低有没有具体的量的经验值呢？...

因为质谱本身就是要有检测多种物质的能力的，所以不能担心杂蛋白的影响、
我现在用的是单TOF，一般要求不低于0.5 mg/ml.
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17楼2013-05-19 01:09:56
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niuyee

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个质谱检测应该是普通的质谱，通常普通的质谱检测误差范围为1%，高精度质谱检测分子量可以精确到1Da，先根据你的蛋白分子量序列算一下你的理论分子量后，看看是否在误差范围之内吧！质谱检测要求样品的纯度应能达到90%以上！再就是对图谱不懂的可以跟检测单位的检测人沟通一下，检测的方法及使用的标准品一般都是可以提供的。希望能帮到你！
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18楼2013-06-08 10:31:11
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niuyee

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by nannan2628 at 2013-05-17 15:32:16
您好，请问做质谱需要的样品纯度一般是什么样的情况呢？...

一般要求样品的纯度大于90%
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19楼2013-06-08 10:32:56
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yuanxiaoxin

新虫 (初入文坛)
问下楼主对蛋白样品是怎么处理的呢?酶切了么还是直接用基质打质谱
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20楼2016-03-19 13:18:35
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