应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » DNA甲基化MSAP分析及银染
51/1返回列表
查看: 3115  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ice0101

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA甲基化MSAP分析及银染

大家好，最近我在做DNA甲基化MSAP分析，在选择性扩增的时候和做PAGE电泳的时候遇到几个问题，希望大家帮帮我，谢谢！
1.下面传了两张选择性扩增的图，我做的手法基本是一样的，但是结果经常出现这种一次有好的带型一次又没有了，甚至有的泳道根本无带了。
2.在PAGE电泳之前，有的文献说需要进行预扩增、并且要将PCR扩增产物变性，请问预扩增和变性与否对实验有何影响？
3.电泳时电压、电流、功率的选择是怎样的？
4.后面还附了一张银染图，感觉不太清晰，条带也不多，和别人论文里的比感觉差好多，请帮我看看吧，多谢了！

12对引物对同一材料的扩增



选扩较好的一次



选扩不好的一次
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

表观遗传

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-06-20 10:55:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不算很123

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
选扩不出条带，有很多问题，可能是引物用的不好，也有可能体系不行。我看了你选扩较好的一次琼脂糖图，选扩效果不好，在琼脂糖中，应该也是多条带，在变性聚丙烯中才能跑出条带。
赞一下 回复此楼
12楼2014-10-26 13:45:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

naonaonvwu

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
ice0101(金币+1): 谢谢参与
wizardfan: 金币+5, 首贴奖励，以后多发帖交流 2012-12-20 07:29:22
你好  我想问问你还在做甲基化嘛？  我也在做MSAP    我觉得你的选扩图有问题   可能酶切没有充分  否则不会是这样的  ，不知道哦啊说的度不对  你看看
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-19 20:56:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

未向真

银虫 (初入文坛)
★
ice0101(金币+1): 谢谢参与
求助，我现在在做MSAP，预扩倒是正常，可是选扩却没有条带，高手拜托解谜
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2013-05-23 01:14:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

农田耕者

金虫 (小有名气)
★
ice0101(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by 未向真 at 2013-05-23 01:14:43
求助，我现在在做MSAP，预扩倒是正常，可是选扩却没有条带，高手拜托解谜

这几天一直在做选扩，也是扩不出来，到时预扩结果不错，郁闷中
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-29 16:53:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭