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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » DNA甲基化MSAP分析及银染
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ice0101

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA甲基化MSAP分析及银染

大家好，最近我在做DNA甲基化MSAP分析，在选择性扩增的时候和做PAGE电泳的时候遇到几个问题，希望大家帮帮我，谢谢！
1.下面传了两张选择性扩增的图，我做的手法基本是一样的，但是结果经常出现这种一次有好的带型一次又没有了，甚至有的泳道根本无带了。
2.在PAGE电泳之前，有的文献说需要进行预扩增、并且要将PCR扩增产物变性，请问预扩增和变性与否对实验有何影响？
3.电泳时电压、电流、功率的选择是怎样的？
4.后面还附了一张银染图，感觉不太清晰，条带也不多，和别人论文里的比感觉差好多，请帮我看看吧，多谢了！

12对引物对同一材料的扩增



选扩较好的一次



选扩不好的一次
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1楼 2012-06-20 10:55:20
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农田耕者

金虫 (小有名气)
★
ice0101(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by 未向真 at 2013-05-23 01:14:43
求助，我现在在做MSAP，预扩倒是正常，可是选扩却没有条带，高手拜托解谜

这几天一直在做选扩，也是扩不出来，到时预扩结果不错，郁闷中
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5楼2013-06-29 16:53:22
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naonaonvwu

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
ice0101(金币+1): 谢谢参与
wizardfan: 金币+5, 首贴奖励，以后多发帖交流 2012-12-20 07:29:22
你好  我想问问你还在做甲基化嘛？  我也在做MSAP    我觉得你的选扩图有问题   可能酶切没有充分  否则不会是这样的  ，不知道哦啊说的度不对  你看看
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2楼2012-12-19 20:56:29
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未向真

银虫 (初入文坛)
★
ice0101(金币+1): 谢谢参与
求助，我现在在做MSAP，预扩倒是正常，可是选扩却没有条带，高手拜托解谜
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2013-05-23 01:14:43
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苹果飞

新虫 (初入文坛)
★
ice0101(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
2楼: Originally posted by naonaonvwu at 2012-12-19 20:56:29
你好  我想问问你还在做甲基化嘛？  我也在做MSAP    我觉得你的选扩图有问题   可能酶切没有充分  否则不会是这样的  ，不知道哦啊说的度不对  你看看

还在做吗？求帮助
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6楼2014-02-21 22:14:05
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