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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 样品如何前处理，过柱如何控制流速、不漏液？
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

[求助] 样品如何前处理，过柱如何控制流速、不漏液？

测定复方制剂中总黄酮，杂质有些多，如何处理？
用聚酰胺粉还是D101型大孔树脂？这两种填料主要是吸附什么物质，如何洗脱杂质？
过柱时如何确定洗脱剂的量，是否洗脱完杂质或要的组分？
还有过柱子时，老从活塞处漏液，涂了凡士林，也不咋管用，连凡士林也流到了收集器中，咋办？流速也不好控制，看资料大部分要求1mL/min，可做时稍微一拧活塞，不是流得太快就是不流，两个极端呀！洗脱完后，能不能用洗耳球吹一吹柱子，让洗脱剂完全流出？

望有经验之士指点一二，感激不尽！
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去做自己想做的
1楼2012-06-15 19:04:36
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星
引用回帖:
2楼: Originally posted by heying136 at 2012-06-16 11:09:27
建议用聚酰胺，聚酰胺树脂主要用来分黄酮类物质的，对黄酮有较好的吸附。上样后先用水洗脱掉杂质，依次用不同浓度的乙醇洗脱，慢慢增加乙醇的比例，例如30%、50%、70%、100%，比例可以自己定，分段收集。看是不是洗 ...

谢谢分享您的经验
我的样品是用50%甲醇提取的，有效成分中含有水溶性成分，上了聚酰胺柱，一开始就用水洗脱杂质，不会把我要的东西洗掉吗？

可以考虑用硅胶管，应该会比活塞好些，但我的方法是首先用氯仿、石油醚等溶剂洗脱杂质，再用甲醇洗脱黄酮，不知氯仿等溶剂是否会溶解腐蚀硅胶管？
哎哟，最要命的是，我们实验室都是带活塞的层析柱！
是，用过量的溶剂洗脱，就应该不用吹嘛！
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去做自己想做的
4楼2012-06-18 22:26:31
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heying136

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-06-17 15:52:04
本帖内容被屏蔽
2楼2012-06-16 11:09:27
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pdl0911

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-06-17 15:52:14
yilishanshan: 金币+2, ★★★很有帮助, 感谢乐于分享您的经验 2012-06-20 00:42:54
我用过D101 水洗部分能除掉 糖 核苷 之类的 对黄酮 酚酸的吸附很好。

流速过慢的话可能是你的样品把柱头给堵了。。
lz可以把活塞擦干再土凡士林，这样不会滑吧？？

至于流速，我建议你用蠕动泵啊~可以控制流速。
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我要努力~
3楼2012-06-17 15:17:32
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星
引用回帖:
3楼: Originally posted by pdl0911 at 2012-06-17 15:17:32
我用过D101 水洗部分能除掉 糖 核苷 之类的 对黄酮 酚酸的吸附很好。

流速过慢的话可能是你的样品把柱头给堵了。。
lz可以把活塞擦干再土凡士林，这样不会滑吧？？

至于流速，我建议你用蠕动泵啊~可以控制流 ...

很感谢您！
没有堵，就是拧活塞的时候，不是不流就是就得太快，不好控制呀！
涂了凡士林，也检漏了，一开始很正常，不漏，但时间久了，就慢慢渗漏，不知道是啥原因？

我们实验室主要是做分析的，不做植化，没有蠕动泵这些装置呀！
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去做自己想做的
5楼2012-06-18 22:30:17
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