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472263516

新虫 (小有名气)

[求助] 硅胶柱的选择

我要用硅胶柱分离脂肪,查到的文献是用20mm(内径)*300mm(柱长)的柱子或者40*600的柱子。
请问我可以用25*400的柱子吗?最好能解释一下原因
谢谢!
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472263516

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by reasong at 2012-06-14 10:11:43
要看你分离量是多少了,如果只是少量脂肪应该可以,脂肪多了就保留不住了。可以先少点脂肪试试。

感谢帮助,我还有几个问题,希望能得到你的帮助。
我的目的是将提取的油分为中性脂肪和极性脂肪,中性脂肪用氯仿洗脱,极性用甲醇洗脱,分别回收后下一步试验。
1你建议油用少量氯仿溶解?少量是多少,大概比例多少?
2什么时候上样?是洗脱液离硅胶面1-2cm高时还是洗脱液刚好完全进入液面时上样?
3我看到有人建议说为了不把柱子表面冲坏,建议在表层加无水硫酸钠或者海沙,那么请问什么时候加,怎么加,加的时候难道不怕把柱子冲坏吗?加的高度是多少?
4最头疼的一个问题是如何判断中性脂肪或者极性脂肪已经完全被洗脱下来了?做TLC需要标样吧,可是中性脂肪和极性脂肪是个混合物。
期待回复
3楼2012-06-15 17:15:48
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reasong

木虫 (小有名气)

科研小丑

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-14 18:25:40
472263516: 金币+5 2012-06-15 17:15:59
要看你分离量是多少了,如果只是少量脂肪应该可以,脂肪多了就保留不住了。可以先少点脂肪试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
过去的过去,未来的未来,把握现在。。。。
2楼2012-06-14 10:11:43
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reasong

木虫 (小有名气)

科研小丑

【答案】应助回帖

树树8013: 食品EPI+1, 谢谢对问题的持续关注,食品EPI一枚,请继续关注食品板块。 2012-06-16 20:29:34
引用回帖:
3楼: Originally posted by 472263516 at 2012-06-15 17:15:48
感谢帮助,我还有几个问题,希望能得到你的帮助。
我的目的是将提取的油分为中性脂肪和极性脂肪,中性脂肪用氯仿洗脱,极性用甲醇洗脱,分别回收后下一步试验。
1你建议油用少量氯仿溶解?少量是多少,大概比例多 ...

我之前做的与你的还有一定区别,一些看法也不一定对,仅供参考:
1加入氯仿是为了降低有的粘度,确保油能够完全转移到柱中,我做的是1g油加了5ml溶剂,然后再洗涤两次。如果油多,可以降低溶剂比例,达到转移到柱中的目的就好。估计你已经看过GB5009.202-2003,可参考。
2我做的是相切时加。
3我加的海沙,无水硫酸钠也好,还能除水。我是在装柱的时候加的,大约0.5mm吧。我不知道你是怎么装柱的,如果是湿装柱,硅胶沉淀后柱中还会有溶剂的,这时候加上硫酸钠,敲实就ok了。
4这个问题我不很清楚。你在用氯仿洗脱时极性物质会下来吗?你可以试一下分段收集,然后每段用TLC试试。
ps:你这个实验会很费劲的,祝你好运。
过去的过去,未来的未来,把握现在。。。。
4楼2012-06-16 16:59:55
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