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十三-小样

铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞免疫荧光 已有10人参与

我做了免疫荧光,细胞质不应该染色的,结构染了一片绿,不知道是抗体浓度过大,还是别的什么原因?

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ilxly

木虫 (小有名气)

★ ★
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yqbter: 金币+1, 鼓励发帖! 2012-06-12 08:16:15
绿色是染的还是GFP啊 要是染的话就是抗体浓度大或者没洗干净了
2楼2012-06-12 04:59:04
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普通回帖

十三-小样

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ilxly at 2012-06-12 04:59:04
绿色是染的还是GFP啊 要是染的话就是抗体浓度大或者没洗干净了

谢谢!是染上去的,本来不该有的。只有最亮的那个才对的。
走好眼前每一步
3楼2012-06-12 09:10:17
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十三-小样

铜虫 (小有名气)

这个是理想的照片。不知道为什么我的就不是这样的。


走好眼前每一步
4楼2012-06-12 09:18:22
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qjy_134

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这个是什么抗体染色的
5楼2012-06-12 09:31:33
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littlechain

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
染色条件呢?
可以试试降低二抗浓度
6楼2012-06-12 10:00:16
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chiscien

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
浓度过高,或者就是二抗没有清洗干净,沾附在细胞上面了!导致一片绿。。
7楼2012-06-12 10:05:46
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十三-小样

铜虫 (小有名气)

封闭液:1%BSA,10%二抗同源血清,PBST
一抗: 1:1000,4℃过夜,
二抗: 1:1000,4℃过夜+室温1小时
PBS洗:脱色摇床每次5分钟。
走好眼前每一步
8楼2012-06-12 11:01:21
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十三-小样

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-06-12 09:31:33
你这个是什么抗体染色的

二抗是Alexa fluor 488
走好眼前每一步
9楼2012-06-12 11:09:19
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


一抗是什么
10楼2012-06-12 11:17:03
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