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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞免疫荧光
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十三-小样

铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞免疫荧光 已有10人参与

我做了免疫荧光，细胞质不应该染色的，结构染了一片绿，不知道是抗体浓度过大，还是别的什么原因？

o
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走好眼前每一步
1楼 2012-06-12 00:40:07
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ilxly

木虫 (小有名气)
★ ★
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yqbter: 金币+1, 鼓励发帖！ 2012-06-12 08:16:15
绿色是染的还是GFP啊 要是染的话就是抗体浓度大或者没洗干净了
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2楼2012-06-12 04:59:04
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十三-小样

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ilxly at 2012-06-12 04:59:04
绿色是染的还是GFP啊 要是染的话就是抗体浓度大或者没洗干净了

谢谢！是染上去的，本来不该有的。只有最亮的那个才对的。
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走好眼前每一步
3楼2012-06-12 09:10:17
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十三-小样

铜虫 (小有名气)
这个是理想的照片。不知道为什么我的就不是这样的。
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走好眼前每一步
4楼2012-06-12 09:18:22
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qjy_134

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这个是什么抗体染色的
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5楼2012-06-12 09:31:33
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littlechain

木虫 (正式写手)
★
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染色条件呢？
可以试试降低二抗浓度
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6楼2012-06-12 10:00:16
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chiscien

铁虫 (初入文坛)
★
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浓度过高，或者就是二抗没有清洗干净，沾附在细胞上面了！导致一片绿。。
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7楼2012-06-12 10:05:46
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十三-小样

铜虫 (小有名气)
封闭液：1%BSA，10%二抗同源血清，PBST
一抗： 1：1000，4℃过夜，
二抗： 1：1000，4℃过夜+室温1小时
PBS洗：脱色摇床每次5分钟。
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走好眼前每一步
8楼2012-06-12 11:01:21
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十三-小样

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-06-12 09:31:33
你这个是什么抗体染色的

二抗是Alexa fluor 488
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走好眼前每一步
9楼2012-06-12 11:09:19
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qjy_134

铜虫 (小有名气)
一抗是什么
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10楼2012-06-12 11:17:03
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