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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求测定过漆酶、木素过氧化物酶、锰过氧化物酶的方法
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)

[求助] 求测定过漆酶、木素过氧化物酶、锰过氧化物酶的方法

求测定过漆酶、木素过氧化物酶、锰过氧化物酶的方法，最好是亲自用过的方法，漆酶最好是ABTS法
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1楼 2012-06-11 10:02:56
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ddan at 2012-06-11 10:23:27
推荐《高效木质素降解菌株的分离筛选》，我做过，但效果不怎么样，希望你成功

效果不怎么样是什么意思呢，我测出来吸光度是负值
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4楼2012-06-12 11:49:11
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by fanxiaojuan at 2012-06-18 12:24:07
酶液灭活，加底物调零的。。。为什么要用蒸馏水调零的？我确实觉得我的参比有问题，因为有时候都浓度太大读不出数来，但方法里面的就是灭活酶液做参比的，郁闷...

这个用蒸馏水或者缓冲液调零就行，酶液样品吸光值大有些分光光度计是不能调零的。计算差值不必用酶液调零，文献里说的是针对纯酶溶液，你酶液都看到颜色了，最好不要用于调零。
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14楼2012-06-18 20:08:06
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凌宇1656

铜虫 (初入文坛)
漆酶我用过可以：反应体系3mL：0.2mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液，pH4.5（2.3mL）；0.5mL粗酶液；0.2mL 2mmol/L ABTS。
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25楼2016-06-01 09:59:33
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ddan

金虫 (小有名气)

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★ ★
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fanxiaojuan: 金币+2 2012-06-12 11:48:20
推荐《高效木质素降解菌株的分离筛选》，我做过，但效果不怎么样，希望你成功
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2楼2012-06-11 10:23:27
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lpl0032

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fanxiaojuan: 金币+2 2012-06-12 11:49:22
你这挺多的啊，是细胞破碎的粗酶液还是买的酶制剂？测过漆酶，用的是ABTS，比酶活也就十几个单位。
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小壁虎子
endnote
3楼2012-06-12 08:47:32
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lpl0032 at 2012-06-12 08:47:32
你这挺多的啊，是细胞破碎的粗酶液还是买的酶制剂？测过漆酶，用的是ABTS，比酶活也就十几个单位。

固态发酵浸提液，你的ABTS具体方法是什么呀，简单的0.5mmoL/L的ABTS和酶液混合呢，还是用缓冲液的，能否发我一个具体方法呢
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5楼2012-06-12 11:52:28
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 欢迎常来微生物板块^_^ 2012-06-12 22:24:22
fanxiaojuan: 金币+2 2012-06-13 10:37:11
木素过氧化物酶和锰过氧化物酶测过，不过是白腐真菌液态发酵产物。Lip是用藜芦醇作底物，测310nm变化；Mnp是双氧水作底物，苯酚红作指示剂，测610nm吸收。
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6楼2012-06-12 20:46:21
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maomao1426

木虫 (著名写手)
不错，我也准备侧。谢谢！
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7楼2012-06-13 09:03:53
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-06-12 20:46:21
木素过氧化物酶和锰过氧化物酶测过，不过是白腐真菌液态发酵产物。Lip是用藜芦醇作底物，测310nm变化；Mnp是双氧水作底物，苯酚红作指示剂，测610nm吸收。

不知道为什么我测得老出现负值，请问你的参比是怎么设定的？
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8楼2012-06-13 10:38:02
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

???????:
8?: Originally posted by fanxiaojuan at 2012-06-13 10:38:02
????????????????????????????α???????趨???...

??知???你说的???比是什么????，310测LiP???光值是增大的，610测MnP是????的
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9楼2012-06-14 19:19:21
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by fanxiaojuan at 2012-06-13 10:38:02
不知道为什么我测得老出现负值，请问你的参比是怎么设定的？...

怎么乱码了，310nm测LiP是增大的，610nm测MnP是减小的
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10楼2012-06-14 19:20:55
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