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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求测定过漆酶、木素过氧化物酶、锰过氧化物酶的方法
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)
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10楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-06-14 19:20:55
怎么乱码了，310nm测LiP是增大的，610nm测MnP是减小的...

我的吸光度数值就是负的。。。。
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11楼2012-06-15 15:43:08
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
fanxiaojuan: 金币+24, 2 2012-06-18 12:24:13
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11楼: Originally posted by fanxiaojuan at 2012-06-15 15:43:08
我的吸光度数值就是负的。。。。...

你是用什么调零，用蒸馏水就可以，即使负数也没关系，要的是变化，是差值
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12楼2012-06-17 21:37:34
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)
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12楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-06-17 21:37:34
你是用什么调零，用蒸馏水就可以，即使负数也没关系，要的是变化，是差值...

酶液灭活，加底物调零的。。。为什么要用蒸馏水调零的？我确实觉得我的参比有问题，因为有时候都浓度太大读不出数来，但方法里面的就是灭活酶液做参比的，郁闷
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13楼2012-06-18 12:24:07
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)
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13楼: Originally posted by fanxiaojuan at 2012-06-18 12:24:07
酶液灭活，加底物调零的。。。为什么要用蒸馏水调零的？我确实觉得我的参比有问题，因为有时候都浓度太大读不出数来，但方法里面的就是灭活酶液做参比的，郁闷...

这个用蒸馏水或者缓冲液调零就行，酶液样品吸光值大有些分光光度计是不能调零的。计算差值不必用酶液调零，文献里说的是针对纯酶溶液，你酶液都看到颜色了，最好不要用于调零。
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14楼2012-06-18 20:08:06
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)
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13楼: Originally posted by fanxiaojuan at 2012-06-18 12:24:07
酶液灭活，加底物调零的。。。为什么要用蒸馏水调零的？我确实觉得我的参比有问题，因为有时候都浓度太大读不出数来，但方法里面的就是灭活酶液做参比的，郁闷...

如果灭活的MnP加底物调零，如果没酶活的MnP反应后测出来是负值，说明有活性。
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15楼2012-06-18 20:11:07
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晒晒月亮

银虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-06-12 20:46:21
木素过氧化物酶和锰过氧化物酶测过，不过是白腐真菌液态发酵产物。Lip是用藜芦醇作底物，测310nm变化；Mnp是双氧水作底物，苯酚红作指示剂，测610nm吸收。

文献中有测431nm的，有测610nm的，我打了下光谱，发现吸收峰在431nm附近，测610nm的是什么理由呢？
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新的一天！
16楼2012-08-10 22:29:03
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)
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16楼: Originally posted by 晒晒月亮 at 2012-08-10 22:29:03
文献中有测431nm的，有测610nm的，我打了下光谱，发现吸收峰在431nm附近，测610nm的是什么理由呢？...

苯酚红氧化前后在610nm处会有明显的吸收变化
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17楼2012-08-11 12:07:37
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1509118638
18楼2012-08-11 16:35:54
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ddan

金虫 (小有名气)
测出来负值，如果方法没问题，就说明你的酶活很小。
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19楼2013-01-08 22:53:53
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by ddan at 2013-01-08 22:53:53
测出来负值，如果方法没问题，就说明你的酶活很小。

嗯，有道理，有文献说这种微生物不产这种酶
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20楼2013-03-26 15:14:15
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