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panjie0113

新虫 (小有名气)

[求助] 求助各位高手链霉菌培养的问题!!!急求。。。。。。

在做链霉菌的发酵,种子培养一段时间后,怎么都接不来菌了,平板、大斜面、甘油管都试过了,用的YE摇种子液,可还是不长菌。。。怎么办啊???不长菌,后面的实验根本没法做,这都停下好久了,各位大侠。。。赐教赐教。。。感激不尽!
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很有可能种子培养的时候种子就是死的,多找找原因吧,有时同一厂家的不同批次的原料也会出问题不一样的。
3楼2012-06-12 15:02:01
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
panjie0113: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-14 21:22:30
可以先在LB琼脂培养基上培养一下你的菌,培养48小时应该有菌落长出,确认你的菌是不是活的。然后看一看原料是否有变化,厂家是否更换、批次是否有变化。再看一下你的控制工艺,培养基的pH,培养过程中控制的温度、pH、摇床的转速等。我现在在做链霉菌的发酵生产抗生素,种子培养基是1%的蛋白胨,1%的氯化钠,1.5%的葡萄糖,0.02%的消泡剂,pH6.5-7.0,其中蛋白胨的影响比较大。在摇瓶中可以加少量的玻璃珠或不锈钢的弹簧,防止在摇瓶培养的时候链霉菌结球影响生长,希望对你有帮助。
2楼2012-06-12 10:23:38
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panjie0113

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by flightty at 2012-06-12 17:22:25
pH是不是太低?

pH都是调在7.2~7.4,应该不会
5楼2012-06-14 21:23:22
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panjie0113

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kedaxiaoyu at 2012-06-12 15:02:01
很有可能种子培养的时候种子就是死的,多找找原因吧,有时同一厂家的不同批次的原料也会出问题不一样的。

那个菌本来就比较难长,现在用甘油接的摇了五天有一些稀疏的菌体了
6楼2012-06-14 21:24:29
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