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有谁知道PE是什么？用来做标记物，红色荧光
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| PE |
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藻红蛋白或藻胆色素蛋白-Phycoerythrin(PE) 存在于被称为藻红的多聚微粒中，位于叶绿素的反应中心，在自然结构中，藻红蛋白吸收光能，吸收后转化成能量，供其发育生长。当藻红蛋白被分离和纯化后，其蛋白质变得具有很强的荧光，能吸收不同波长的光，发出亮红色的荧光，此时不再接受任何外来的光，也不能转移光能。藻红蛋白PE的吸收波长范围较广，最大的吸收波长为566nm，最大的发射波长为574nm。藻红蛋白作为荧光标记物具有以下优点：首先具有强的长波长激发和发射荧光，可避免来自其他生物材料荧光的干扰；并且具有极高的发射量子产率；另外PE具有非常高的水溶性而且与许多生物学或合成材料的多位点稳定交联。 红蛋白或称藻胆蛋白是一种来源于藻青菌(Cyanobacteria)和真核菌类相当稳定的具有很强溶解性的荧光蛋白。这些蛋白质含有共价连接的四吡咯基团(tetrapyrolegroup)，其生物学作用是聚集光，通过荧光共振能源传递转化成一对特殊的叶绿素分子，定位在光合反应中心。 因为具有光收集功能，藻红蛋白的光吸收和发射荧光最大，而内部能量传递或外界pH值或离子组成对荧光猝灭影响降低到最小。藻红蛋白利用共价键结合的形式与抗体免疫球蛋白或其他蛋白质结合，形成稳定的复合。 应用其复合物进行免疫荧光组织化学、流式细胞仪和FISH的检测，对抗原或DNA、RNA进行定量和定性分析，也是双重标记或多重标记首选的荧光蛋白。 藻红蛋白作为荧光标记物具有以下优点。 ①具有强的长波长激发和发射荧光，可避免来自其他生物材料荧光的干扰； ②Stokes移位相当大，具极高的发射量子产率； ③荧光不被外部试剂猝灭，通过与蛋白质主链的共价结合, 荧光基团可被保护. ④具有非常高的水溶性； ⑤有明确分子质量的齐性结构(homogeneousstructure)； ⑥与许多生物学或合成材料的多位点稳定交联。 藻红蛋白可分为D—藻红蛋白(phycoerythin B；B-PE)、R—藻红蛋白(R-PE)和异位(或别)藻蓝蛋白(allophycocyamin；APC)。 (一)藻红蛋白的光谱特点 各型藻红蛋白的光量子产率高达o．98，消光系数高达2．4X106cm-1·m01．L-1。以lmol为基准，在可比较的波长，荧光产率等于至少30个未猝灭的荧光黄分子或100个罗丹明分子的荧光产率。 (二)藻红蛋白的应用 各型藻红蛋白均有商品化产品，例如二抗标记的B-PE、R-PE和APC，生物素化的B—PE、R-PE和APC，亲和素标记的B-PE、R-PE和APC产品。其敏感性APC最高，其结合物的稳定性B-PE比R-PE更好，但R-PE结合物的稳定性可通过加入1—丙基没食子酸盐(propyl gallate)而增强。可与其他绿色荧光素标记物进行双重免疫荧光组化标记。 我用过的流式抗体用这个的较多，共聚焦等荧光抗体也有 |
3楼2012-06-10 23:09:47
4楼2012-06-10 23:14:56