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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 荧光观察花粉管萌发时，除了花粉其它部分也显绿色荧光是什么原因？
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我这一生

新虫 (小有名气)

[求助] 荧光观察花粉管萌发时，除了花粉其它部分也显绿色荧光是什么原因？

大家好，我在用水溶性苯胺蓝观察甘草花粉管在花柱中的萌发时，发现除了花粉管显绿色荧光外，花柱壁细胞也显绿色。
十分苦恼，不知是何故，求解。谢谢啦。
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1楼 2012-06-08 13:25:44
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lpsdau

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 我这一生 at 2012-06-11 23:07:26
呵呵，谢谢这位虫友的提示。如果真的像你说的那样，花柱壁细胞具有自发荧光，请问有没有什么方法能够消除自发荧光的干扰呢？再次感谢！...

荧光显微镜是多波长激发，如果自发荧光物质（如木质素或者胼胝质）的激发波长正好位于此波段内，就会观察到自发荧光。使用CLSM可设置激光单波长激发，即甲苯胺蓝的最大激发波长，如果此波长并非胞壁自发荧光物质的激发波长，则可有效去除胞壁自发荧光。
听起来很复杂，实际上就是在CLSM上尝试甲苯胺蓝的最大激发波长附近的几个波长，如果看不到了自发荧光，就OK了。
文献上应该会有苯胺蓝常用的激发波长，你可以直接试一下。
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13楼2012-06-12 00:03:21
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zhangjian1122

铁杆木虫 (著名写手)

博士

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我这一生: 金币+25, ★有帮助 2012-06-09 09:40:05
这可能是空心花柱所导致的 花柱里有苯胺蓝的原因
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2楼2012-06-08 23:20:38
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我这一生

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangjian1122 at 2012-06-08 23:20:38
这可能是空心花柱所导致的 花柱里有苯胺蓝的原因


苯胺蓝在荧光下也会显色吗？如果是苯胺蓝残留的话，我能不能先把染了苯胺蓝的材料放在蒸馏水里漂洗一下然后再封片观察？你以前遇到过这种问题吗？谢谢你啦。
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3楼2012-06-09 09:39:05
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zhangjian1122

铁杆木虫 (著名写手)

博士
★ ★
jhu132llh: 金币+2, 鼓励积极参与讨论 2012-06-10 21:14:35
你可以试一下漂洗 看效果如何 花粉管与苯胺蓝的荧光程度差异还是蛮大的
每种植物的花粉管染色效果是不一样的 你也考虑下换种频率的激发光 多摸索下 祝你早日成功
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4楼2012-06-10 07:49:01
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