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我这一生

新虫 (小有名气)

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[求助] 荧光观察花粉管萌发时，除了花粉其它部分也显绿色荧光是什么原因？

大家好，我在用水溶性苯胺蓝观察甘草花粉管在花柱中的萌发时，发现除了花粉管显绿色荧光外，花柱壁细胞也显绿色。
十分苦恼，不知是何故，求解。谢谢啦。

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1楼 2012-06-08 13:25:44

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lpsdau

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

11楼: Originally posted by 我这一生 at 2012-06-11 23:07:26
呵呵，谢谢这位虫友的提示。如果真的像你说的那样，花柱壁细胞具有自发荧光，请问有没有什么方法能够消除自发荧光的干扰呢？再次感谢！

...

荧光显微镜是多波长激发，如果自发荧光物质（如木质素或者胼胝质）的激发波长正好位于此波段内，就会观察到自发荧光。使用CLSM可设置激光单波长激发，即甲苯胺蓝的最大激发波长，如果此波长并非胞壁自发荧光物质的激发波长，则可有效去除胞壁自发荧光。
听起来很复杂，实际上就是在CLSM上尝试甲苯胺蓝的最大激发波长附近的几个波长，如果看不到了自发荧光，就OK了。
文献上应该会有苯胺蓝常用的激发波长，你可以直接试一下。