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9楼: Originally posted by lpsdau at 2012-06-11 19:16:13
这个需要排除花柱壁细胞的自发荧光。如果在荧光显微镜下可见，而在confocal下不可见，那肯定就是花柱壁细胞的自发荧光了。

呵呵，谢谢这位虫友的提示。如果真的像你说的那样，花柱壁细胞具有自发荧光，请问有没有什么方法能够消除自发荧光的干扰呢？再次感谢！

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11楼2012-06-11 23:07:26

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引用回帖:

10楼: Originally posted by llyman at 2012-06-11 19:46:39
大概3-4厘米长，只要是比较大，木兰科的花的柱头，可以看吗...

长度没有大问题，就是看柱头大到什么程度。个人觉得应该问题不大，虫友你试一下整体压片观察吧。如果要切片，观察就不好观察了。

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12楼2012-06-11 23:10:19

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lpsdau

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【答案】应助回帖

引用回帖:

11楼: Originally posted by 我这一生 at 2012-06-11 23:07:26
呵呵，谢谢这位虫友的提示。如果真的像你说的那样，花柱壁细胞具有自发荧光，请问有没有什么方法能够消除自发荧光的干扰呢？再次感谢！

...

荧光显微镜是多波长激发，如果自发荧光物质（如木质素或者胼胝质）的激发波长正好位于此波段内，就会观察到自发荧光。使用CLSM可设置激光单波长激发，即甲苯胺蓝的最大激发波长，如果此波长并非胞壁自发荧光物质的激发波长，则可有效去除胞壁自发荧光。
听起来很复杂，实际上就是在CLSM上尝试甲苯胺蓝的最大激发波长附近的几个波长，如果看不到了自发荧光，就OK了。
文献上应该会有苯胺蓝常用的激发波长，你可以直接试一下。

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13楼2012-06-12 00:03:21

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