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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助核酸中所有蛋白去除的方法，要求高回收率
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woshiai

银虫 (小有名气)

[求助] 求助核酸中所有蛋白去除的方法，要求高回收率

各位虫友，最近在做用HPLC分离鉴定RNA氧化后单核苷酸变化的实验，但RNA经核酸酶，磷酸酶处理后，需要去除这些酶（无分子量限制的全部去除），才能上样，由于RNA量比较少，不能用普通的抽提法。查文献得知millipore的去酶管可以去除。但已经停产了，怎么也买不到。请教各个虫友，有什么方法或产品可以代替的吗？
先谢谢啦！
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1楼 2012-06-08 09:48:12
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
woshiai: 金币+5, ★有帮助, 谢谢回复，已经找到方法 2012-06-11 09:27:30
RNA经核酸酶、磷酸酶处理后，应该主要是小分子吧
是不是可以考虑用脱盐柱处理，收集小分子部分。
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2楼2012-06-08 16:00:42
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ypng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
woshiai: 金币+5, ★有帮助, 谢谢回复，已经找到方法 2012-06-11 09:27:49
过葡聚糖GPC柱可以解决这个分子量大小的问题,收集小分子部分,其实为什么不能用沉淀法呢?或者过膜解决这个问题呢?只是提建议
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3楼2012-06-09 08:17:09
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woshiai

银虫 (小有名气)
谢谢各位的回复，已经找到解决办法，原则上用millipore的超滤管可去除这些酶。
但还需要实验验证。
谢谢各位回复。
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4楼2012-06-11 09:30:36
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