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落叶秋霜

金虫 (小有名气)

[求助] 多糖分离纯化 急

我现在在做多糖分离纯化,我用的是DEAE纤维素柱,洗脱剂为氯化钠溶液,我第一次分离纯化结束,第二次上样之前是否需要对柱子进行处理?要怎样处理?(注:不是因为色素吸附严重)。请大家指教。
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chong//虫

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 14:03:25
肯定要进行处理了,先用2mol/L的NaCl溶液洗,再用Tris缓冲液或磷酸盐缓冲液平衡,保证柱子PH与缓冲溶液一样,这样就OK了。

我想问下:所有的都必须用2MNaCl溶液洗吗?用自己洗脱的最高的NaCl溶液洗可以吗?是在柱子上流洗还是填料倒出来之后洗?然后再酸碱处理好还是直接水洗好?我的洗脱液是水和不同梯度的氯化钠,谢谢!
5楼2013-12-25 18:37:32
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housexpf99

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖应助! 2012-07-24 13:24:12
落叶秋霜: 金币+2 2012-07-24 21:52:22
落叶秋霜: 金币+1 2012-08-15 16:54:59
对于用过的纤维素,可以重复利用多次,但需要经过再生处理后才可以使用。再生处理可先用高浓度NaCl (1-2 mol/L)过柱冲洗柱床,以除去DEAE阴离子交换纤维所吸附的成份。然后,再用0.5 mol/L的HCl和NaOH处理,处理方法与预处理完全相同。
不喜欢搞科研,还是难逃魔掌
2楼2012-07-24 11:38:12
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
落叶秋霜: 金币+1 2012-07-24 21:52:04
落叶秋霜: 金币+1 2012-08-15 16:58:11
肯定要进行处理了,先用2mol/L的NaCl溶液洗,再用Tris缓冲液或磷酸盐缓冲液平衡,保证柱子PH与缓冲溶液一样,这样就OK了。
海纳百川,有容乃大
3楼2012-07-24 14:03:25
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xll8380

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
落叶秋霜: 金币+1 2012-07-24 21:51:50
落叶秋霜: 金币+1 2012-08-15 16:58:16
用高浓度NaCl洗去离子键结合的杂质,0.5M NaOH 可以洗去共价键结合杂质。3楼回答很好!
4楼2012-07-24 20:17:42
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