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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 多糖分离纯化 急
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落叶秋霜

金虫 (小有名气)

[求助] 多糖分离纯化 急

我现在在做多糖分离纯化，我用的是DEAE纤维素柱，洗脱剂为氯化钠溶液，我第一次分离纯化结束，第二次上样之前是否需要对柱子进行处理？要怎样处理？（注：不是因为色素吸附严重）。请大家指教。
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我追求，但不苛求；我向往，但不奢望
1楼 2012-06-06 17:49:13
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housexpf99

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖应助！ 2012-07-24 13:24:12
落叶秋霜: 金币+2 2012-07-24 21:52:22
落叶秋霜: 金币+1 2012-08-15 16:54:59
对于用过的纤维素，可以重复利用多次，但需要经过再生处理后才可以使用。再生处理可先用高浓度NaCl (1－2 mol/L)过柱冲洗柱床，以除去DEAE阴离子交换纤维所吸附的成份。然后，再用0.5 mol/L的HCl和NaOH处理，处理方法与预处理完全相同。
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不喜欢搞科研，还是难逃魔掌
2楼2012-07-24 11:38:12
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
落叶秋霜: 金币+1 2012-07-24 21:52:04
落叶秋霜: 金币+1 2012-08-15 16:58:11
肯定要进行处理了，先用2mol/L的NaCl溶液洗，再用Tris缓冲液或磷酸盐缓冲液平衡，保证柱子PH与缓冲溶液一样，这样就OK了。
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海纳百川，有容乃大
3楼2012-07-24 14:03:25
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xll8380

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
落叶秋霜: 金币+1 2012-07-24 21:51:50
落叶秋霜: 金币+1 2012-08-15 16:58:16
用高浓度NaCl洗去离子键结合的杂质，0.5M NaOH 可以洗去共价键结合杂质。3楼回答很好！
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4楼2012-07-24 20:17:42
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chong//虫

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 14:03:25
肯定要进行处理了，先用2mol/L的NaCl溶液洗，再用Tris缓冲液或磷酸盐缓冲液平衡，保证柱子PH与缓冲溶液一样，这样就OK了。

我想问下：所有的都必须用2MNaCl溶液洗吗？用自己洗脱的最高的NaCl溶液洗可以吗？是在柱子上流洗还是填料倒出来之后洗？然后再酸碱处理好还是直接水洗好？我的洗脱液是水和不同梯度的氯化钠，谢谢！
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5楼2013-12-25 18:37:32
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