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fangfeng1979

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 请教:C18反相柱怎样才能冲得够干净?

这些天做液相,进的对照品做出来在对照品的峰之彰有一些杂七杂八的峰,弄得人挺郁闷的,担心是以前做的时候没有把柱子冲好,请教怎么冲才能把柱子冲得够干净呢?
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月亮弯弯

金虫 (著名写手)


karl2100(金币+1):3Q
根据你分析样品有关,如果用的是有缓冲盐的流动相,一定先要用水:甲醇(95:5)多冲洗一段时间,再用甲醇冲洗,最后一般用甲醇或乙腈保存色谱柱。
2楼2007-04-25 21:05:55
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smileair56

捐助贵宾 (小有名气)


补充几句,根据你分析样品有关,如果用的是有缓冲盐的流动相,一定先要用水:甲醇(95:5)冲洗大约20分钟,然后用甲醇或者乙腈冲30分钟,至基线平,最后一般用甲醇或乙腈保存色谱柱。
3楼2007-04-26 08:12:58
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zhr7

银虫 (初入文坛)


可乐=枫(金币+1):谢谢。
先用5%的甲醇冲30min,再用甲醇冲,还不行用乙腈、异丙醇冲,最后用甲醇保存色谱柱
4楼2007-04-26 09:04:10
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fangfeng1979

至尊木虫 (正式写手)

谢谢各位的帮助
5楼2007-04-26 19:53:39
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vivienyang22

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1):3Q
通常情况下,如果流动相含有盐应该先用水冲柱子然后用甲醇保存柱子,如果流动相是有机相可直接用甲醇或乙腈冲柱子后保存(大多数的实验室会选择用甲醇,因为乙腈的黏度比较大,容易将泵中的宝石珠粘住),但有时仅这样做也是无法让基线走平的在你第二天用的时候,因为色谱柱也是有寿命的,尤其是用于做中药分析的柱子,因中药含有的杂质较多容易在柱子中形成死吸附,所以柱子的寿命相对较短.
6楼2007-04-26 21:11:14
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twt_1975

木虫 (小有名气)

★ ★
可乐=枫(金币+2):谢谢应助。
同意6楼的看法。一般用盐后,要用水冲柱子比较好一点。不要用5%的甲醇。原来我也用的,后来发现反相C18柱还是没有那么不顶事的。一般用完盐用水冲保证少于20分钟,它的修饰物是不会破坏的,这样也能更好的冲洗干净。再就的我觉得做中药的来说,现在的质量标准简直就是以牺牲柱子为代价的。因为现在柱子的性能和以前已经不能同日而语了。分离度各方面都有了很大的提高,但是不知道各位发现没有,现在的中药前处理越来越简单,把那些杂质大量的用柱了来处理了。你说柱子能不降低使用寿命吗。我发现以前做的质量标准都是有复杂的前处理过程,做样时几乎没有什么过多的杂质峰,当然可能由于原来柱子的性能没有现在这么完美,可我觉得这两者之间不知道是得到的多还是失去的多,对于色谱工作者来说是应该思考一下,大家说是不是呀

[ Last edited by twt_1975 on 2007-4-27 at 10:02 ]
7楼2007-04-27 10:00:07
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xiaoruiyuan

铜虫 (初入文坛)


karl2100(金币+1):谢谢!
c18反相色谱柱的冲洗:如果用的是有缓冲盐的流动相,一定先要用95%冲洗至少30分钟,然后用甲醇或者乙腈冲至基线平,最后一般用甲醇或者乙腈保存色谱柱,建议用甲醇,因为甲醇比较便宜。呵呵…………,另外,有条件的话,建议用梯度洗脱的方法冲洗色谱柱,这样效果会更加。

   另外,如果色谱柱非常脏,可用异丙醇(色谱纯) 冲洗。
8楼2007-05-07 22:29:35
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sinoyxh

纠正一下前面的观点,乙腈的黏度比甲醇低,一般不选用乙腈是因为乙腈毒性较大,且价格比甲醇高
9楼2007-05-08 08:02:09
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ymm117


可乐=枫(金币+1):3Q
我倒觉得其实未必是C18柱没有冲干净。你在进样之前有没有清洗进样阀呢?进样阀污染会导致你每次进样都带入杂质,对照品也出杂峰就不奇怪了。色谱柱有问题,更多可能是柱效降低,出肩峰,或者是双峰。
10楼2007-05-08 09:05:16
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