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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 请教:C18反相柱怎样才能冲得够干净?
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fangfeng1979

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 请教:C18反相柱怎样才能冲得够干净?

这些天做液相,进的对照品做出来在对照品的峰之彰有一些杂七杂八的峰,弄得人挺郁闷的,担心是以前做的时候没有把柱子冲好,请教怎么冲才能把柱子冲得够干净呢?
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1楼 2007-04-25 20:47:41
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月亮弯弯

金虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1):3Q
根据你分析样品有关，如果用的是有缓冲盐的流动相，一定先要用水：甲醇（95：5）多冲洗一段时间，再用甲醇冲洗，最后一般用甲醇或乙腈保存色谱柱。
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2楼2007-04-25 21:05:55
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smileair56

捐助贵宾 (小有名气)
补充几句，根据你分析样品有关，如果用的是有缓冲盐的流动相，一定先要用水：甲醇（95：5）冲洗大约20分钟，然后用甲醇或者乙腈冲30分钟，至基线平，最后一般用甲醇或乙腈保存色谱柱。
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3楼2007-04-26 08:12:58
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zhr7

银虫 (初入文坛)
★
可乐=枫(金币+1):谢谢。
先用5％的甲醇冲30min，再用甲醇冲，还不行用乙腈、异丙醇冲，最后用甲醇保存色谱柱
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4楼2007-04-26 09:04:10
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fangfeng1979

至尊木虫 (正式写手)
谢谢各位的帮助
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5楼2007-04-26 19:53:39
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vivienyang22

金虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1):3Q
通常情况下,如果流动相含有盐应该先用水冲柱子然后用甲醇保存柱子,如果流动相是有机相可直接用甲醇或乙腈冲柱子后保存(大多数的实验室会选择用甲醇,因为乙腈的黏度比较大,容易将泵中的宝石珠粘住),但有时仅这样做也是无法让基线走平的在你第二天用的时候,因为色谱柱也是有寿命的,尤其是用于做中药分析的柱子,因中药含有的杂质较多容易在柱子中形成死吸附,所以柱子的寿命相对较短.
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6楼2007-04-26 21:11:14
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twt_1975

木虫 (小有名气)
★ ★
可乐=枫(金币+2):谢谢应助。
同意6楼的看法。一般用盐后，要用水冲柱子比较好一点。不要用5%的甲醇。原来我也用的，后来发现反相C18柱还是没有那么不顶事的。一般用完盐用水冲保证少于20分钟，它的修饰物是不会破坏的，这样也能更好的冲洗干净。再就的我觉得做中药的来说，现在的质量标准简直就是以牺牲柱子为代价的。因为现在柱子的性能和以前已经不能同日而语了。分离度各方面都有了很大的提高，但是不知道各位发现没有，现在的中药前处理越来越简单，把那些杂质大量的用柱了来处理了。你说柱子能不降低使用寿命吗。我发现以前做的质量标准都是有复杂的前处理过程，做样时几乎没有什么过多的杂质峰，当然可能由于原来柱子的性能没有现在这么完美，可我觉得这两者之间不知道是得到的多还是失去的多，对于色谱工作者来说是应该思考一下，大家说是不是呀

[ Last edited by twt_1975 on 2007-4-27 at 10:02 ]
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7楼2007-04-27 10:00:07
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xiaoruiyuan

铜虫 (初入文坛)
★
karl2100(金币+1):谢谢！
c18反相色谱柱的冲洗：如果用的是有缓冲盐的流动相，一定先要用95%冲洗至少30分钟，然后用甲醇或者乙腈冲至基线平，最后一般用甲醇或者乙腈保存色谱柱，建议用甲醇，因为甲醇比较便宜。呵呵…………，另外，有条件的话，建议用梯度洗脱的方法冲洗色谱柱，这样效果会更加。

   另外，如果色谱柱非常脏，可用异丙醇（色谱纯） 冲洗。
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8楼2007-05-07 22:29:35
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sinoyxh

纠正一下前面的观点，乙腈的黏度比甲醇低，一般不选用乙腈是因为乙腈毒性较大，且价格比甲醇高
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9楼2007-05-08 08:02:09
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ymm117

★
可乐=枫(金币+1):3Q
我倒觉得其实未必是C18柱没有冲干净。你在进样之前有没有清洗进样阀呢？进样阀污染会导致你每次进样都带入杂质，对照品也出杂峰就不奇怪了。色谱柱有问题，更多可能是柱效降低，出肩峰，或者是双峰。
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10楼2007-05-08 09:05:16
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