24小时热门版块排行榜    

查看: 2908  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lwq652

木虫 (正式写手)

[求助] 大片段连接

我有一个很大的片段,5k多,但是载体也就5k多,连接了一个多月了还是连不上,请问有没有什么好方法或者好的试剂(盒)可以把类似于我这样的条件的片段连接的。我现在用的是酶切连接。目标序列都是已知的,谢谢啦
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萝卜丝儿

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+2, 萝卜丝儿得到的质粒克隆应该18k了,大质粒操作起来可是相当有难度的~ 2012-06-05 08:35:41
只要坚持连,一定连得上。。。我把6.7kb的片段连到11k的载体上也硬是做了一个多月才做出来。还有换一个效率高的感受态会有很大帮助
好好学习,天天向上!
9楼2012-06-05 02:50:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

roger077

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-03 20:29:31
lwq652: 金币+2 2012-06-03 21:56:53
你可以尝试一下利用同源重组克隆技术的试剂盒,应该是可以,之前我用过金斯瑞的试剂盒,还不错,另外clontech也有这种盒子,不过比较贵
2楼2012-06-03 15:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

怎么知道没连接上呢
3楼2012-06-03 22:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+2, 有道理~虽然麻烦点,分步连接也是个可选的方法 2012-06-05 08:32:58
引用回帖:
3楼: Originally posted by gongeleven at 2012-06-03 22:24:12
怎么知道没连接上呢

根据5K片段里的酶切位点 ,把它弄成两段或三段,然后一段一段的连
4楼2012-06-04 08:43:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求材料调剂 +6 隔壁陈先生 2026-03-12 6/300 2026-03-18 15:35 by cmz0325
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +3 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:33 by laoshidan
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +6 Liwangman 2026-03-15 6/300 2026-03-18 13:21 by 尽舜尧1
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[考研] 【0856】化学工程(085602)313 分,本科学科评估A类院校化学工程与工艺,诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 8/400 2026-03-17 16:57 by ruiyingmiao
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
请填处理意见