24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2947  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lwq652

木虫 (正式写手)

[求助] 大片段连接

我有一个很大的片段,5k多,但是载体也就5k多,连接了一个多月了还是连不上,请问有没有什么好方法或者好的试剂(盒)可以把类似于我这样的条件的片段连接的。我现在用的是酶切连接。目标序列都是已知的,谢谢啦
回复此楼
一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

怎么知道没连接上呢
3楼2012-06-03 22:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

roger077

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-03 20:29:31
lwq652: 金币+2 2012-06-03 21:56:53
你可以尝试一下利用同源重组克隆技术的试剂盒,应该是可以,之前我用过金斯瑞的试剂盒,还不错,另外clontech也有这种盒子,不过比较贵
2楼2012-06-03 15:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+2, 有道理~虽然麻烦点,分步连接也是个可选的方法 2012-06-05 08:32:58
引用回帖:
3楼: Originally posted by gongeleven at 2012-06-03 22:24:12
怎么知道没连接上呢

根据5K片段里的酶切位点 ,把它弄成两段或三段,然后一段一段的连
4楼2012-06-04 08:43:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xzx018

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+1, 我连过接近4k的,用的普通的方法,操作的时候多加小心就行了~ 2012-06-05 08:33:29
我3000多的连上了 载体是t载体才两千多,模板还好的情况下应该算比较好连吧
5楼2012-06-04 09:15:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本2一志愿C9-333分,材料科学与工程,求调剂 +3 升升不降 2026-03-31 3/150 2026-03-31 06:30 by wxiongid
[考研] 083000环境科学与工程调剂,总分281 +4 橙子(胜意) 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +11 lllllos 2026-03-30 11/550 2026-03-30 21:19 by 研究僧导导
[考研] 085601材料工程找调剂 +17 oatmealR 2026-03-29 18/900 2026-03-30 19:21 by Wang200018
[考研] 289求调剂 +16 新时代材料 2026-03-27 16/800 2026-03-30 19:04 by Wang200018
[考研] 材料专硕调剂 +11 椰椰。 2026-03-29 11/550 2026-03-30 16:21 by wangjy2002
[考研] 329求调剂 +8 星野? 2026-03-26 8/400 2026-03-30 13:41 by chemdavid
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 总分293求调剂 +8 加一一九 2026-03-25 11/550 2026-03-29 19:53 by 无际的草原
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-27 7/350 2026-03-28 07:43 by 热情沙漠
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 0703化学338求调剂! +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见