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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何从酸奶中筛选乳酸杆菌
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love水

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我分离了好久，还没弄出来，很烦的~~~~就是梯度筛选，您现在有没好的方法了啊？
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坚持迈出每一步~~
21楼2012-08-29 17:01:16
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kuailejiuhao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jayzhao520 at 2012-05-28 20:29:17
咳咳，空气中还有乳酸菌呢，牛奶里连牛尿都有，细菌超标不知多少...

牛奶一般都会经过巴氏灭菌的，太多的杂菌发酵牛奶不会腐败变质吗？我想问
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22楼2013-05-09 22:38:40
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carrieskl

木虫 (著名写手)
我上个学期才做过酸奶分乳杆菌练手，全套的方法都有。
你要是多给金币我就告诉你~
玩了半个月小木虫了，攒金币强迫症。。。虽然我也不知道用来干嘛。。
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争做医生中最好的厨子
23楼2013-05-10 00:27:24
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javadig

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jayzhao520 at 2012-05-28 08:13:49
酸奶建议你不要用中国的，里面够呛有活的乳酸菌，但是其他细菌肯定不少
先找你要筛选的乳酸菌的选择培养基，用平板稀释法筛选

真的假的？国内的酸奶这么差？
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24楼2013-05-14 07:14:32
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wnagcolin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

取酸奶样品，梯度稀释，一般酸奶活菌数1千万cfu/mL，选取适当稀释梯度，用MRS培养基倾注平板法，37℃，培养48h以上，选择单菌落，挑选一半染色镜检，如果是杆菌，保存另一半，分离纯化数次，提取16S rDNA，送公司测序，在NCBI上比对，做系统发育树，确定种属
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25楼2013-05-14 10:30:07
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wnagcolin

金虫 (正式写手)
引用回帖:
23楼: Originally posted by carrieskl at 2013-05-10 00:27:24
我上个学期才做过酸奶分乳杆菌练手，全套的方法都有。
你要是多给金币我就告诉你~
玩了半个月小木虫了，攒金币强迫症。。。虽然我也不知道用来干嘛。。

厉害啊，半个月攒了800多金币，我金币都不够花，天天盼着天上掉下来个金蛋，支几招呗~~~~
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26楼2013-05-14 15:20:19
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carrieskl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
26楼: Originally posted by wnagcolin at 2013-05-14 15:20:19
厉害啊，半个月攒了800多金币，我金币都不够花，天天盼着天上掉下来个金蛋，支几招呗~~~~...

哈哈哈 我的木虫注册很久了一直没用，最近开始攒金币，一个都没花过。。。。守财奴啊-。-
大致过程是这样：
1-买酸奶，生产日期越近越好，最好是上面写着活菌数的（我用的蒙牛冠益乳，不是广告啊），然后直接接种环蘸酸奶在MRS平板上划线就能得到单菌落，37度厌氧，1天多2天，没必要稀释或者什么的。
2-从一堆单菌落里根据菌落形态每种挑几个，然后再划线。
3-长出单菌落后，挑菌落的一半染色镜检，另一半接种到液体MRS培养基里（嗜酸乳杆菌菌落很小，容易一挑就没了，要小心）。镜检就能发现里面能有三四种不同形态的（我弄出来四种，也许还有别的）。
4-不放心的话还可以再划线（或者涂布）纯化，镜检一遍，看跟上次镜检结果是否一样。
5-液体MRS，37度厌氧增菌。用试剂盒提DNA。
6-16s DNA PCR 送测序。
7-你就知道你分出来的都是什么了。。。有可能跟酸奶配料表里写的不大一样。

还有什么问题尽管问吧！求金币。。
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争做医生中最好的厨子
27楼2013-05-14 16:02:21
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carrieskl

木虫 (著名写手)
楼主不给金币
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争做医生中最好的厨子
28楼2013-05-16 10:28:42
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alimar

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以用MRS培养基进行筛选，先对长出来的菌进行革兰氏染色，镜检，确定形态，再做其他相关的生理生化指标，最终用16S测序。
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29楼2013-05-16 13:37:37
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琪瑶儿

金虫 (小有名气)
打算试一下
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海洋环境微生物《DGGE，海洋污染修复
30楼2013-07-15 16:10:29
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