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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 考马斯亮蓝测蛋白质
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a317236770

木虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝测蛋白质

1.考马斯亮蓝法测蛋白质含量的发明者用牛血清蛋白作为标准蛋白质溶液，我可以用待测液中的蛋白质做标准液吗？
2.为什么要在595nm下测吸光度，不同蛋白质染色后，最大吸收波长不会改变吗？我的明胶溶液染色后扫描出最大吸收波长为585nm。
3.此方法的测定范围是1--1000μg/ml，如果我要测定的溶液中蛋白质含量超出此范围，可以用蒸馏水直接稀释到此范围吗？

[ Last edited by a317236770 on 2012-5-22 at 21:12 ]
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1楼 2012-05-22 21:02:49
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colorfulmiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
a317236770: 金币+8, ★★★★★最佳答案, 谢谢你的帮助！ 2012-05-25 14:58:46
2 用595nm是因为考马斯与蛋白结合后的最大吸收波长位于595 与考马斯有关的 和蛋白影响不大
4. 黄原胶没用过 但是你可以先用它与考马斯试一下 1mL考马斯加20uL黄原胶什么的 观察颜色变化 如果显著变色说明影响很大
5 不用缓冲盐配制标准蛋白没问题 我就是用纯水配制的 缓冲溶液是起到保护蛋白的作用 但我测蛋白浓度时候样品蛋白是用纯水溶解的 因此标准蛋白也是纯水溶解 看你的样品中含有什么物质了 标准蛋白一般都是配好分装 -20℃保存 做一次拿一管用完用不完都扔掉
祝实验成功~
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亦余心之所善兮虽九死其犹未悔
9楼2012-05-25 11:16:33
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xhjggl

木虫 (正式写手)
silicare: 屏蔽内容, 违规存档 2012-07-12 09:34:17
本帖内容被屏蔽
2楼2012-05-22 21:28:50
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a317236770

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xhjggl at 2012-05-22 21:28:50:
可以下载上海生工的SK3031  SK3033  SK3041  说明书看看。

我没用试剂盒
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3楼2012-05-22 22:02:13
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lxfbsh2003

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+2, 有帮助，鼓励交流哈 2012-05-22 22:26:58
1，可以，如果你有已知含量的待测液中蛋白的话，而且易于得到。因为牛血清比较常用，而且易购买，相对经济。
3，建议用你溶解蛋白的缓冲溶液
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4楼2012-05-22 22:13:34
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