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a317236770

木虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝测蛋白质

1.考马斯亮蓝法测蛋白质含量的发明者用牛血清蛋白作为标准蛋白质溶液,我可以用待测液中的蛋白质做标准液吗?
2.为什么要在595nm下测吸光度,不同蛋白质染色后,最大吸收波长不会改变吗?我的明胶溶液染色后扫描出最大吸收波长为585nm。
3.此方法的测定范围是1--1000μg/ml,如果我要测定的溶液中蛋白质含量超出此范围,可以用蒸馏水直接稀释到此范围吗?

[ Last edited by a317236770 on 2012-5-22 at 21:12 ]
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
a317236770: 金币+2, 有帮助 2012-05-23 18:00:11
一般是用BSA做标曲的
因为考马斯染色后吸收峰在595
这个标曲范围可以做到1~100的,以前我自己做过,而且是根据你的蛋白浓度来制定具体标曲范围的,如果你提到的蛋白浓度偏低,就需要1~100的,我个人觉得这个范围比较准确一点
7楼2012-05-23 16:48:04
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xhjggl

木虫 (正式写手)

silicare: 屏蔽内容, 违规存档 2012-07-12 09:34:17
本帖内容被屏蔽

2楼2012-05-22 21:28:50
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a317236770

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xhjggl at 2012-05-22 21:28:50:
可以下载上海生工的SK3031  SK3033  SK3041  说明书看看。

我没用试剂盒
3楼2012-05-22 22:02:13
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lxfbsh2003

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+2, 有帮助,鼓励交流哈 2012-05-22 22:26:58
1,可以,如果你有已知含量的待测液中蛋白的话,而且易于得到。因为牛血清比较常用,而且易购买,相对经济。
3,建议用你溶解蛋白的缓冲溶液
4楼2012-05-22 22:13:34
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