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88539361

新虫 (初入文坛)

[求助] 毛细管电泳迁移时间突然改变

我用25mM硼酸-15mM磷酸盐缓冲溶液,ph6.5 ,40MSDS,3%正丙醇,分离农药,刚开始还好,但是最近一段时间发现当溶剂峰迁移时间突然延长1min钟后,标品出峰时间就延长了,本来20min能实现所有物质的分离,但是现在分离度增加,峰展宽,60min物质也没完全出完。重新活化不管用,换管后立马就恢复了,但是没做几天又这样,周而复始,请问是什么原因啊?
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
两针之间的毛细管平衡、活化很关键,你试着简化一下缓冲液,硼酸+磷酸+SDS+正丙醇,是不是太复杂了
梦想、激情、灵感、体验--che
4楼2012-05-22 08:36:34
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506892679

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
溶剂或农药对毛细管有影响,容易被吸附,而难洗脱!其实你一换柱子,它的参数也会收到影响,测量的也不准确吧?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做快乐的自己……
2楼2012-05-22 07:10:47
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
buffer中或被分析物中有组分对毛细管产生影响。观察一下你的被分析物出峰的峰面积,如果峰面积发生递减改变,很可能是被分析被吸附了。不过,最可能发生的原因是被分析物和SDS胶束产生的胶团在毛细管内壁产生了吸附或其它作用。
活化时你可以试着将温度提高至50℃。否则,你就换管子吧。
另,如果做研究,可以试着将毛细管内壁进行修饰来减少这种作用的发生。
七窍通了六窍
3楼2012-05-22 08:18:44
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