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怎么表征磁珠上修饰上了蛋白呢?
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wjjia
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[交流]
怎么表征磁珠上修饰上了蛋白呢?
怎么表征磁珠上修饰上了蛋白呢?
与磁珠偶联之后的蛋白上清液用bradford法测定,但是感觉不准确,不知道有什么方法可以对磁珠上偶联的蛋白进行定量或者定性分析也可?拜托
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2012-05-21 10:10:32
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yqbter: 金币+2, 专业的回答!!
2012-05-25 10:05:51
并不是要用全部的磁珠做电泳,你制备100体积的珠子,取1~10体积的珠子检测蛋白的纯度和浓度是必须的吧,下游的实验也需要这样的control作为指标。分子生物学用作蛋白相互作用的有葡聚糖珠,制备的时候也是这样检测的,你可以参考这方面的实验技术。至于考马斯蓝蛋白染色是很经典的实验方法,国内国外都在用,没什么过时的说法。broadford本身的染料也是考马斯蓝。不过你对蛋白质电泳这方面好像不太懂,建议你问问身边做生物的具体的细节
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wjjia
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7楼
2012-05-24 20:59:19
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★
wjjia(金币+1): 谢谢参与
太专业了,不知道。望高人尽快给你答复!!!!!!!!
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2012-05-21 10:19:23
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★
wjjia(金币+1): 谢谢参与
用蛋白电泳buffer煮珠子,如果有蛋白应该游离出来,之后跑sds-page胶,用考马斯蓝染色
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3楼
2012-05-21 15:58:59
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3楼
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Originally posted by
mascotte
at 2012-05-21 15:58:59:
用蛋白电泳buffer煮珠子,如果有蛋白应该游离出来,之后跑sds-page胶,用考马斯蓝染色
不过我需要用修饰上的蛋白哦,让蛋白游离出来就没办法做下一步喽,很感谢
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4楼
2012-05-22 14:15:53
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