| 查看: 3289 | 回复: 17 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
wangyuanji银虫 (小有名气)
|
[求助]
HPLC测定的样品，pH值应该在什么范围？
|
|
|
最近准备检测大鼠脑中神经递质，查阅文献后发现，在样品前处理方法上，有很多种，有的用0.1M HClO4沉淀蛋白后直接进样，有的采用甲醇或乙腈沉淀蛋白后进样。我们实验室ECD（常用来测单胺类神经递质）和FD（常用来测氨基酸类神经递质）都有问题了可能不能用，所以只能选择样品衍生化后HPLC-UV检测了。我的问题是： 1）用0.1M HClO4沉淀蛋白后直接进样，pH值很低（<=2），这样直接进样会不会对进样阀色谱柱有影响？蛋白能沉淀完全吗？ 2）采用HPLC-UV检测神经递质，需要衍生化，我看文献，沉淀蛋白后挥干溶剂，残渣用Na2CO3-NaHCO3（pH 9.5）复溶，加丹酰氯衍生化后进样。有谁做过这个衍生化反应吗？应该注意什么问题呢？同样，pH 9.5会对进样阀及色谱柱有影响吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
明天应该可查了！？
已经有5人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有7人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有8人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
人气不行了
已经有10人回复
-
我面上完蛋了
已经有10人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有24人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有17人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有19人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 乳酸的HPLC分析求助
已经有21人回复
- HPLC中流动相的pH问题？
已经有41人回复
- 请问HPLC中色谱柱使用的pH值范围是多少
已经有6人回复
- HPLC检测液的pH问题
已经有11人回复
- 【交流】HPLC交流交流，呵呵，有问题集中讨论嘛
已经有104人回复
- 【求助】测定样品PH值时，样品配成溶液时，浓度应该配多大？
已经有4人回复
- 【资源】高效液相色谱仪使用遇到的问题
已经有24人回复
wangyuanji
银虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1741.2
- 红花: 7
- 帖子: 183
- 在线: 236.5小时
- 虫号: 635866
- 注册: 2008-10-24
- 性别: MM
- 专业: 药物分析
9楼2012-05-22 08:20:49
manengxuan
木虫 (小有名气)
木木
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 2460.2
- 散金: 5
- 帖子: 103
- 在线: 36.4小时
- 虫号: 1671524
- 注册: 2012-03-07
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
2楼2012-05-18 20:24:20
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 鼓励新虫，加油。 2012-05-18 21:09:25
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 鼓励新虫，加油。 2012-05-18 21:09:25
|
关于色谱柱选择 常见色谱柱的PH适用范围主要取决于色谱填料性质。 可供选择有1. 聚合物基质色谱柱，PH适用范围1~14，但主要缺点柱效比键合硅胶柱要差一点。当然有些聚合物基质填料的色谱柱柱效也很好，能满足分析要求。 2. 键和硅胶。低PH（﹤2）值长期使用的色谱柱有agilent的zorbax SB 和博纳艾杰尔的ASB 。 3.宽PH值色谱柱（1~12）有watersh的Xbridge，agilent 的extend，艾杰尔的Durashell。这几款柱子适用高PH值 流动相。 当然，还有其他合适的不同厂家的色谱柱。 |
3楼2012-05-18 20:53:28
yugijiang
木虫 (著名写手)
- 应助: 661 (博士)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 4018.4
- 红花: 11
- 帖子: 1790
- 在线: 178小时
- 虫号: 416091
- 注册: 2007-06-29
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
4楼2012-05-19 08:19:17
