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新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:亚细胞定位中如何选择高尔基体标记物

我正在做一种突变蛋白的亚细胞定位,请教各位几个问题:
1、文献中用抗p58抗体、抗GM130抗体、抗á-mannosidase II 抗体、抗β-COP抗体、抗TGN46抗体的都有,请问哪种标记物比较好呢?(我用的是Hela细胞)
2、有些文献中只用了上述抗体中的一种,有些则用了多种,并注明Golgi cisternae, anti-GM130 ;TGN, anti-TGN46 rabbit polyclonal ;ERGIC, monoclonal anti-Golgi
58K protein ;用一种说明问题即可,还是要用多种抗体明确位于高尔基体的那个部位才好。
3、有些文献中写用brefeldin A孵育后再固定,有什么意义吗?
请各位高手不吝赐教!多谢
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生如夏花
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新虫 (初入文坛)

没人做这方面吗?
生如夏花
2楼2012-05-21 08:52:51
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eykong2005

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助哦 2012-06-18 13:33:00
qyww11163com: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-07-24 09:45:40
你要是大概看看golgi的位置,其实都可以。TGN和cop, mannosidase等都是和golgi运输相关的,也可以标记出golgi的位置。如你所猜测的,他们可能标记golgi的不同位置。
Brefeldin A,简称BFA,是一种常用的蛋白转运抑制剂,特异性地可逆地阻断蛋白质从内质网(ER)转运到高尔基体(Golgi)。如果要区分ER和golgi蛋白的话,可以用一下。
3楼2012-06-17 18:22:40
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