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求助：亚细胞定位中如何选择高尔基体标记物
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我正在做一种突变蛋白的亚细胞定位，请教各位几个问题： 1、文献中用抗p58抗体、抗GM130抗体、抗á-mannosidase II 抗体、抗β-COP抗体、抗TGN46抗体的都有，请问哪种标记物比较好呢？（我用的是Hela细胞） 2、有些文献中只用了上述抗体中的一种，有些则用了多种，并注明Golgi cisternae, anti-GM130 ；TGN, anti-TGN46 rabbit polyclonal ；ERGIC, monoclonal anti-Golgi 58K protein ；用一种说明问题即可，还是要用多种抗体明确位于高尔基体的那个部位才好。 3、有些文献中写用brefeldin A孵育后再固定，有什么意义吗？ 请各位高手不吝赐教！多谢 |
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新虫 (初入文坛)
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2楼2012-05-21 08:52:51
【答案】应助回帖
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你要是大概看看golgi的位置，其实都可以。TGN和cop， mannosidase等都是和golgi运输相关的，也可以标记出golgi的位置。如你所猜测的，他们可能标记golgi的不同位置。 Brefeldin A，简称BFA，是一种常用的蛋白转运抑制剂，特异性地可逆地阻断蛋白质从内质网(ER)转运到高尔基体(Golgi)。如果要区分ER和golgi蛋白的话，可以用一下。 |
3楼2012-06-17 18:22:40
