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邓楠

铁虫 (小有名气)

[求助] 测蛋白质浓度-样品含有4%SDS-25mM DTT

我的蛋白质样品含有4%SDS和25mM DTT,想测蛋白质浓度,但是 BCA方法要求 SDS ﹤5%,DTT﹤ 1mM;Brandford方法要求  DTT﹤ 5mM,SDS﹤0.01%,不知道还有没有其他方法可以容忍这些或者能够高回收率的去除SDS,从而测得蛋白质的浓度呢?谢谢...
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+2, 鼓励回答 2012-05-16 18:16:12
邓楠: 金币+1, 有帮助 2012-05-16 22:54:29
直接将蛋白装入到透析袋子或者商品化透析架子,在PBS或者对应的缓冲液中透析去掉DTT和SDS.
之后测定蛋白浓度
好好做事,踏实做人!
6楼2012-05-16 10:27:24
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

引用回帖:
8楼: Originally posted by 邓楠 at 2012-05-16 11:12:25:
这种方法,回收率高吗?我的样品大概500uL。。。

样品量怎么这么少?
放心好了,这不是回收,这是透析,你所有的样品理论上都在。
好好做事,踏实做人!
9楼2012-05-16 12:16:36
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

引用回帖:
10楼: Originally posted by 邓楠 at 2012-05-16 13:32:06:
你有试过吗?损失大不大?

建议去查一下透析原理
好好做事,踏实做人!
13楼2012-05-16 21:11:34
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