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duyumeng1989

新虫 (初入文坛)

[求助] C18柱柱压高，高水相和高有机相冲洗，压力均不降

新买的迪马C18柱测定生物样本，使用不到一个月，岛津的色谱仪，有预柱；
有一次使用磷酸二氢钾的缓冲液（PH3.0）：乙腈（15:85）作为流动相，流速从0.2ml/min直接升到了1，压力突然升高，立即停泵，用乙腈-水（10:90）冲洗，当时压力已经降下来了，继续用乙腈-水以0.2的流速过夜以后，第二天早上来，压力又升高了，
已经试过用90%水-乙腈，90%水-甲醇，纯乙腈，纯甲醇冲洗，柱压都没降下来；
发现用0.2%的醋酸水溶液做水相的时候，压力下降2-3MPa，但换成水以后，又会有上升趋势，
到底是缓冲盐析出了，还是别的东西堵了啊，为什么我冲了这么久，柱压还是不降啊；各位大侠救命啊~~~
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1楼 2012-05-15 21:22:47
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duyumeng1989

新虫 (初入文坛)
非常感谢大家的帮助，我咨询了客服，说我的可能是残留的蛋白质与缓冲盐结合后，沉淀在柱子里了，建议我用0.1%三氟乙酸冲洗，效果还不错，柱压又降低，虽然没完全降至以前，柱效也挺好，
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15楼2012-05-22 09:07:29
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2012-05-15 21:38:08
既然有预柱，直接卸下预柱，取柱芯，异丙醇超声清洗或更换即可。
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守候在风中的宁静。
2楼2012-05-15 21:27:07
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duyumeng1989

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-05-15 21:27:07:
既然有预柱，直接卸下预柱，取柱芯，异丙醇超声清洗或更换即可。

预柱换了新柱芯，柱套也超声过了，现在预柱压力大约3MPa，
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3楼2012-05-15 21:33:17
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-15 22:45:45
duyumeng1989: 金币+2 2012-05-22 09:07:53
引用回帖:
3楼: Originally posted by duyumeng1989 at 2012-05-15 21:33:17:
预柱换了新柱芯，柱套也超声过了，现在预柱压力大约3MPa，

1。是否排除流动相组分及流速变化，引起管路中流动相粘度变化，进而引起压力变化。
2。确定到底是管路有盐析出抑或是色谱柱有污染致使压力偏高。（卸下色谱柱后检查压力判断）
3。若非色谱柱原因，检查管路配件是否有析出或污染，如单向阀，密封圈。
4。色谱柱原因，用75%乙腈25%水清洗1h，改用异丙醇1h试试看。
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守候在风中的宁静。
4楼2012-05-15 21:40:31
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