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yanglei8128

新虫 (小有名气)

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[求助] 做过ABTS自由基清除试验的请进在线等已有5人参与

最近在做ABTS自由基清除试验，可是发现工作液的OD值一直在下降，这样试验就没法做下去了，不知各位有没有这种情况的发生，如果有，如何解决的，非常感谢！
我的做法如下：
储备液1：7 mM ABTS水溶液
储备液2: 4.9 mM 过硫酸钾水溶液
母液：将储备液1和2等体积混合，室温避光反应12-16h
工作液：将母液用pH 7.4的磷酸缓冲液稀释至OD734=0.7±0.02
以上是引用其它同学的发帖，相同的配制方法也遇到相同的问题，储备液稀释后一小时内吸光值就由0.685下降到0.432，这样就不能用了啊，急请做过的大侠帮帮忙！十分感谢！

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上善若水

1楼2012-05-14 18:17:35

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

qiaqia832

铜虫 (正式写手)

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引用回帖:

17楼: Originally posted by yanglei8128 at 2012-05-16 22:37:19:
恩我可以参考下，就是不太了解这个避光怎么操作，在配置和稀释过程中都没法做到完全避光啊

棕色瓶装溶液，锡箔纸或者黑色袋子把试剂瓶外面包严实，当然，也不可能完全的避光，我测得时候实验室灯比较暗，只要你按照比较正规的方法配置，吸光值不会降低很多的，除非你的溶液被污染了，因为ABTS是个很好清除的自由基，加一点儿待测样品就能变成无色了，所以玻璃仪器得洗干净，尽量不要有抗氧化性物质残留什么的，取溶液的时候也要注意，实验不理想是多方面的，有时候是试剂的问题，有时候是操作问题，你具体分析依稀自己的原因吧。