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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 植物RNA的提取
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+3, Good！ 2012-05-14 18:52:49
欢仔: 金币+3, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 2012-05-14 21:25:18
同意楼上的意见，可能要在操作上下点功夫。楼主所说的CTAB-SDS法，我只查到2012年中国农学通报上一篇关于葡萄的文章，不知楼主是否参考的这个。这种方法没见别的文献有报道，建议楼主参考时要谨慎。
多糖多酚类植物材料提RNA，我觉得主要需要添加一步抽提派出糖及酚的干扰，我手头收集的文献有建议使用70%丙酮抽提后用SDS-LiCl法提取。此外还有很多文献提出有用的建议，楼主不妨以比较可靠的经典方法做基础，参考这些文献自己摸索一下，不要盲目照着单一文献做。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
11楼2012-05-14 18:17:50
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-14 18:17:50:
同意楼上的意见，可能要在操作上下点功夫。楼主所说的CTAB-SDS法，我只查到2012年中国农学通报上一篇关于葡萄的文章，不知楼主是否参考的这个。这种方法没见别的文献有报道，建议楼主参考时要谨慎。
多糖多酚类植 ...

嗯 我就是参考的那篇
我以前用的就是SDS-licl的方法 方法好像存在点问题 你关于这个方法的文献能不能发给我下 谢谢
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勇于尝试新鲜事物
12楼2012-05-14 21:24:19
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淘气维尼89

木虫 (小有名气)
我最近也在提RNA，如果除糖的话，加入KAc抽提下比较好；还有就是含酚多，那在酚、氯仿抽提后应该再用氯仿抽提，除酚的效果较好。以上意见仅供参考
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13楼2012-05-15 09:01:38
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 淘气维尼89 at 2012-05-15 09:01:38:
我最近也在提RNA，如果除糖的话，加入KAc抽提下比较好；还有就是含酚多，那在酚、氯仿抽提后应该再用氯仿抽提，除酚的效果较好。以上意见仅供参考

一般加KAC后，是要冰浴吗
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勇于尝试新鲜事物
14楼2012-05-15 12:57:32
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wlyanddmj

铜虫 (正式写手)
请问楼主的最后的室温干燥，怎么干燥的呀……
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15楼2012-05-21 11:33:58
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by wlyanddmj at 2012-05-21 11:33:58:
请问楼主的最后的室温干燥，怎么干燥的呀……

我是放在超净台上 用风吹几分钟
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勇于尝试新鲜事物
16楼2012-05-23 00:35:52
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
引用回帖:
16楼: Originally posted by 欢仔 at 2012-05-23 00:35:52:
我是放在超净台上 用风吹几分钟

嗯..................
       嘿嘿 教你个更加有效的干燥方法：
       乙醇洗完后 倾倒掉大部分乙醇 后短暂离心 甩1-2s即可 使用100uL的移液枪套上黄枪头后再套10uL系列白枪头（这样主要是底下剩余的液体绝对比10uL多 但黄枪头开口大移液时肯定移不干净 同时可能粘乙醇到壁上） 需要用力攥紧（这里需要点技巧）这时候吸取底部残余乙醇 不用2分钟基本就能干透 避免了RNA长时间暴漏于空气中
       我基本上8个样品的话 吸掉最后一个样品的乙醇时第一个已经干透了
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Let God do with it as He wills
17楼2012-05-23 00:54:57
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-23 00:54:57:
嗯..................
       嘿嘿 教你个更加有效的干燥方法：
       乙醇洗完后 倾倒掉大部分乙醇 后短暂离心 甩1-2s即可 使用100uL的移液枪套上黄枪头后再套10uL系列白枪头（这样主要是底下剩余的液体绝对比

谢谢
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勇于尝试新鲜事物
18楼2012-05-23 22:34:18
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wansanlian

金虫 (小有名气)
我们的方法都是按照这个方法，不过结果还算可以啊～
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乱花渐欲迷人眼
19楼2012-05-26 13:57:22
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by wansanlian at 2012-05-26 13:57:22
我们的方法都是按照这个方法，不过结果还算可以啊～

你们用的也是SDS-licl方法吗
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勇于尝试新鲜事物
20楼2012-05-27 10:34:05
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