24小时热门版块排行榜

返回列表

本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

MolEPI: 50
应助: 94 (初中生)
贵宾: 3.157
金币: 1849.6
散金: 11458
红花: 116
沙发: 21
帖子: 7553
在线: 1449.5小时
虫号: 271749
注册: 2006-08-13
性别: GG
专业: 细胞衰老
管辖: 分子生物

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking: 回帖置顶 2012-05-13 17:34:46
amisking: 金币+5, MolEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-13 17:34:53

引用回帖:

6楼: Originally posted by luckking at 2012-05-13 14:47:59:
能不能给个好方法？

你那个酶我没用过，看了说明书，貌似是很神奇的东西。
现在问题是P不出来，可以采取延长退火时间，降低退火温度，增加延伸时间，增加循环数这些通用的方法。
不过你既然是反转录PCR，那也有可能是cDNA模板质量不好。优化PCR之前，最好确认下模板质量，可以用actin等内参基因来做PCR（可以用Taq等便宜的酶），假如内参都扩增不出来，那很显然cDNA不能用。

另外，你的片段不到3kb，为毛要用这个酶啊。我看它的特长是扩增长片段，能到30kb，这是挺了不起的。相应的，价格应该很贵吧？这个很浪费啊，估计老板还不知道你这么干吧？呵呵~我建议你还是用Takara的PrimeSTAR® HS DNA Polymerase，程序用普通的就行了。

赞一下

回复此楼

8楼2012-05-13 16:14:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

RT-PCR弥散带问题已经有11人回复
求助！关于RT-PCR的问题！已经有20人回复

点击这里搜索更多相关资源

科研从小木虫开始，人人为我，我为人人

相关版块跳转我要订阅楼主 luckking 的主题更新

返回列表