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日月当空

铁虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质的鉴定!

本人从大豆中提取了一种蛋白质(大豆胰蛋白酶抑制剂的一种类型,简称KTI,分子量约为20kD),想验证该蛋白质就是KTI,除了SDS-PAGE电泳之外,还有什么手段可以验证?请各位高手指点。
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
western blot就可以吧,不过这不是个首选方法
2楼2012-05-12 21:48:33
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励应助哈 2012-05-12 23:16:42
嗯.......................
       证明此蛋白质就是KTI?
       OMG 岂不是要2-DE后MS的?WB还需要抗体,还需要构建带标签的重组蛋白..............................
Let God do with it as He wills
3楼2012-05-12 22:07:14
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日月当空

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-12 22:07:14:
嗯.......................
       证明此蛋白质就是KTI?
       OMG 岂不是要2-DE后MS的?WB还需要抗体,还需要构建带标签的重组蛋白..............................

请问有没有像高效液相或质谱之类,不要那么复杂的方法啊?
4楼2012-05-12 22:22:57
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anzaigtt

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主是不是个子很高的那个东北人?
5楼2012-05-13 12:48:21
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日月当空

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by anzaigtt at 2012-05-13 12:48:21:
楼主是不是个子很高的那个东北人?

不好意思,我不是
6楼2012-05-13 13:09:21
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twisty

木虫 (正式写手)

newer

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最好最保险的是根据你的蛋白性质作个鉴别才行啊,方法不是目的。
兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
7楼2012-05-13 14:39:23
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flyy1986

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果你的蛋白质序列已知的话,做个质谱鉴定,比如分子量,或者N端测许或者指纹

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2012-05-13 17:24:38
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sayaya

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-14 13:37:59
日月当空: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2012-05-15 13:21:37
蛋白鉴定方法有:

传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序(Edman法)、已知或未知蛋白的共迁移分析(comigration);

现代的蛋白鉴定方法,如图象分析、微量测序和与质谱相关的技术(如肽质指纹技术、肽片段的部分测序、氨基酸组分分析)等。
9楼2012-05-14 08:26:53
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lanziliuli

银虫 (小有名气)

质谱鉴定吧,比较快
做好科研
10楼2012-08-30 11:18:55
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