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陈帅印

铁虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR,是相对定量相关问题请教。

我现在正在做荧光定量PCR,是相对定量,用ΔΔCT法,新手,请问:到底两品系的起始RNA量是不是要调成相同
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leannele

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-14 13:48:20
我听我们实验室的人说是,要开始的时候RNA定量,反转录后的cDNA最好也定量。跑完之后内参基因的Ct值相差不能大于一个循环。我现在在做相对定量,RNA浓度是一致了,可能是RNA的质量不一致吧,内参的循环差了快2个Ct值了。RNA调浓度的时候最好不要加水稀释,直接测好浓度后取相应的体积就行了。
5楼2012-05-14 11:27:20
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